詳細介紹
D/L-氨基酸(手性氨基酸)LC/MS分析用衍生試劑
(R)-BiAC法(手性氨基酸LC/MS分析)
氨基酸是廣泛存在于生物體內和自然界中的化合物。它存在著兩種對映異構體,即L-氨基酸和D-氨基酸,但幾乎主要是以L-氨基酸的形式存在。近年研究表明,微量存在的D-氨基酸與記憶、學習能力等有關1),因此,D-氨基酸與L-氨基酸的分離分析越發(fā)重要。
(R)-BiAC是一種衍生化試劑,可用于柱前衍生化法對D/L-氨基酸(手性氨基酸)進行LC/MS分析。使用(R)-BiAC試劑無需使用專用設備,即可高分辨率、短時間(12 min)地進行手性氨基酸分析。
1)Hashimoto, A., Oka, T.: Prog. Neurobiol., 52, 325 (1997).
◆特點
無需專用設備,可使用LC/MS檢測手性氨基酸!
使用(R)-BiAC進行柱前衍生化,無需專用設備,使用LC/MS即可檢測手性氨基酸。
約12 min即可實現(xiàn)20種D/L氨基酸同時分析!
可短時間內同時分析多種手性氨基酸。
可實現(xiàn)手性氨基酸的高靈敏度檢測!
可提高MS的電離效率,還能以atto mol水平的靈敏度檢測手性氨基酸。
◆衍生化步驟
試劑制備
(R)-BiAC試劑:(R)-BiAC 5 mg + 乙腈1 mL
硼酸緩沖液:APDS標簽硼酸鹽緩沖液(產(chǎn)品編號:019-23151)1+乙腈1
衍生化
◆20種氨基酸的手性分析示例1)
LC/MS/MS 色譜圖
成分名 | 檢測離子(m/z) | 成分名 | 檢測離子(m/z) | 成分名 | 檢測離子(m/z) |
Ala | 384.1 | Ile | 426 | Thr | 414 |
Arg | 235.2 | Leu | 426 | Trp | 499 |
Asn | 427 | Lys | 368.4 | Tyr | 476 |
Asp | 428.2 | Met | 444 | Val | 412 |
Gln | 441 | Phe | 460.1 | Cys2 | 415.9 |
Glu | 442 | Pro | 410.2 | Gly | 371 |
His | 225.6 | Ser | 400 |
檢測條件
[儀器]
Shimadzu Nexera ×2 HPLC System / Sciex Triple Quad™ 6500
[HPLC條件]
色譜柱:YMC Triart-phenyl 2.1 mm × 50 mm (1.9 μm)
柱溫:40℃
洗脫劑:A) 0.1% HCOOH in 10 mM HCOONH3 aq., B) CH3CN: H2O= 95︰5
梯度:
Time (min.) | B conc. (%) |
0-3 | 14-16 |
3-5 | 16-28 |
5-9.3 | 28-33 |
9.3-11.0 | 33-50 |
11.0-11.4 | 50-90 |
11.4-12.9 | 90 |
流速:0.4 mL/min
[MS]
模型:SRM
1) 唐川幸聖, 原田真志: 和光純薬時報, 87(1), 5 (2019).
◆產(chǎn)品列表
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 |
012-19851 | Acetonitrile 乙腈 | 1 L | LC/MS用 氨基酸分析用 |
018-19853 | Acetonitrile 乙腈 | 3 L | LC/MS用 氨基酸分析用 |
019-23151 | APDSTAG Wako Borate Buffer APDS標簽硼酸鹽緩沖液 | 1 L | 氨基酸自動分析用 |
063-04533 | Formic Acid (abt. 99%) 甲酸( 約99%) | 1 mL×5A | LC/MS用 |
067-04531 | Formic Acid (abt. 99%) 甲酸( 約99%) | 50 mL | LC/MS用 |