詳細(xì)介紹
LabAssay™ HDL膽/固/醇
LabAssay™ HDL-Cholesterol
Cholesterol以脂蛋白的微粒形式在體內(nèi)循環(huán)。脂蛋白種類多樣,其中HDL(High Density Lipoprotein)可將組織、外周細(xì)胞及血液中多余的Cholesterol運(yùn)送到肝臟,防止血液中的Cholesterol增加,從而抑制脂質(zhì)代謝異常及動(dòng)脈硬化。HDL-Cholesterol水平降低常見于冠心病、高脂血癥、吸煙、肥胖、糖尿病和肝病患者,同時(shí)也是冠心病的主要風(fēng)險(xiǎn)因素之一。
本產(chǎn)品可檢測血液(血清/血漿)中的HDL-Cholesterol,使用微孔板可快速簡便地檢測樣品中的HDL-Cholesterol,且無需離心分離脂蛋白。
※LabAssay™ 系列產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)研究用,不能用于臨床診斷。
◆試劑盒性能
物種 | 人、小鼠、大鼠 |
樣品 | 血清、血漿 |
標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍 | 6.25-200 mg/dL |
所需樣品量 | 5 μL |
檢測時(shí)間 | 20 min |
檢測法 | 顯色法 (主波長 600 nm/副波長 700 nm) |
◆標(biāo)準(zhǔn)曲線示例
◆原理
第一反應(yīng)階段(清除非HDL-Cholesterol)
前處理液中的親水基和疏水基可保護(hù)樣品中的HDL免受Cholesterol氧化酶(CO)和Cholesterol酯酶(CHE)的影響。此外,HDL以外的脂蛋白,如乳糜微粒(CM)、極低密度脂蛋白(VLDL)和低密度脂蛋白(LDL)(非高密度脂蛋白Cholesterol)中的Cholesterol會(huì)在CO和CHE的作用下分解為脂肪酸和Δ4- 膽甾烯酮,同時(shí)生成過氧化氫。而生成的過氧化氫會(huì)在過氧化氫酶的作用下被分解為水。
第二反應(yīng)階段(HDL-Cholesterol顯色)
反應(yīng)試劑發(fā)揮作用時(shí),HDL中的Cholesterol在CO和CHE的作用下生成過氧化氫。生成的過氧化氫在過氧化物酶(POD)的作用下會(huì)使N-(3-硫代丙基)-3-甲氧基-5-jia基苯胺(HMMPS)和4-氨基安/替/比林發(fā)生定量氧化縮合,生成一種藍(lán)色色素。通過檢測這種藍(lán)色的吸光度,可確定樣品中的HDL-Cholesterol濃度。
◆數(shù)據(jù)
精確度測試(批內(nèi)差異)
使用本產(chǎn)品分別對人、小鼠、大鼠的2種濃度血清樣品進(jìn)行5次重復(fù)檢測,確認(rèn)精確度。
n\ID | 人 | 小鼠 | 大鼠 | |||
ID1 (mg/dL) | ID2 (mg/dL) | ID1 (mg/dL) | ID2 (mg/dL) | ID1 (mg/dL) | ID2 (mg/dL) | |
1 | 82.3 | 33.3 | 72 | 21.2 | 55 | 21.4 |
2 | 82.5 | 32.2 | 73.2 | 20.7 | 53.5 | 21.5 |
3 | 82.2 | 32.9 | 72.1 | 21.2 | 54 | 21.1 |
4 | 81.9 | 33.4 | 71.4 | 22.1 | 54.3 | 22.8 |
5 | 82.2 | 32.9 | 72.8 | 21.3 | 55.8 | 22.1 |
平均值 | 82.2 | 32.9 | 72.3 | 21.3 | 54.5 | 21.8 |
SD | 0.22 | 0.47 | 0.71 | 0.5 | 0.9 | 0.68 |
CV(%) | 0.26 | 1.4 | 0.98 | 2.4 | 1.7 | 3.1 |
【結(jié)果】
人血清的CV(%)為 0.26-1.4%,小鼠血清的CV(%)為 0.98-2.4%,大鼠血清的CV(%)為 1.7-3.1%,結(jié)果良好。
再現(xiàn)性測試(批間差異)
使用本產(chǎn)品在4天內(nèi)分別對3種不同濃度的人、小鼠、大鼠血清樣品進(jìn)行3次重復(fù)檢測。
Day\ID | 人 | 小鼠 | 大鼠 | ||||||
ID1 (mg/dL) | ID2 (mg/dL) | ID3 (mg/dL) | ID1 (mg/dL) | ID2 (mg/dL) | ID3 (mg/dL) | ID1 (mg/dL) | ID2 (mg/dL) | ID3 (mg/dL) | |
1 | 79.2 | 47 | 25.2 | 77.7 | 44.6 | 26.3 | 56 | 39.7 | 19 |
2 | 77.6 | 45.4 | 23.6 | 74.2 | 42.2 | 25.2 | 58.4 | 39.6 | 18.2 |
3 | 80.5 | 48.8 | 24.8 | 79.9 | 45.2 | 26.8 | 60.5 | 41.5 | 19 |
4 | 79.2 | 46.9 | 25.1 | 80.5 | 44.4 | 26.5 | 59.1 | 40.5 | 18.8 |
平均值 | 79.1 | 47 | 24.7 | 78.1 | 44.1 | 26.2 | 58.5 | 40.3 | 18.8 |
SD | 1.2 | 1.4 | 0.74 | 2.9 | 1.3 | 0.7 | 1.9 | 0.88 | 0.38 |
CV(%) | 1.5 | 3 | 3 | 3.7 | 3 | 2.7 | 3.2 | 2.2 | 2 |
【結(jié)果】
人血清樣品的CV(%)為 1.5-3.0%、小鼠血清樣品的 CV(%)為 2.7-3.7%,大鼠血清樣品的 CV(%)為 2.0-3.2%,所有結(jié)果均良好。
稀釋線性試驗(yàn)
使用產(chǎn)品附帶的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,按倍數(shù)稀釋2種濃度的人血清/血漿(EDTA)、小鼠血清/血漿(EDTA)和大鼠血清/血漿(EDTA)后,進(jìn)行檢測并確認(rèn)線性關(guān)系(平行檢測兩次)。
【結(jié)果】
檢測范圍內(nèi)均顯示出良好的線性關(guān)系。
加標(biāo)回收測試
向人血清/血漿(EDTA)、小鼠血清/血漿(EDTA)和大鼠血清/血漿(EDTA)中添加3種濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,進(jìn)行加標(biāo)回收測試(平行檢測兩次)。
人
添加量(mg/dL) | 實(shí)測值(mg/dL) | 回收量(mg/dL) | 回收率(%) | |
血清 | - | 39.5 | - | - |
11.3 | 50.3 | 10.8 | 95.6 | |
22.5 | 61.8 | 22.3 | 99.1 | |
28.2 | 67.1 | 27.6 | 97.9 | |
血漿 (EDTA) | - | 36 | - | - |
7.72 | 43.8 | 7.8 | 101 | |
15.4 | 50.4 | 14.4 | 93.5 | |
19.3 | 54.3 | 18.3 | 94.8 |
小鼠
添加量(mg/dL) | 實(shí)測值(mg/dL) | 回收量(mg/dL) | 回收率(%) | |
血清 | - | 11.7 | - | - |
11.8 | 22.5 | 10.8 | 91.5 | |
35.4 | 47 | 35.3 | 99.7 | |
59.1 | 67.4 | 55.7 | 94.2 | |
血漿 (EDTA) | - | 10.5 | - | - |
9.34 | 19.2 | 8.7 | 93.1 | |
28 | 36.6 | 26.1 | 93.2 | |
46.7 | 54.9 | 44.4 | 95.1 |
大鼠
添加量(mg/dL) | 實(shí)測值(mg/dL) | 回收量(mg/dL) | 回收率(%) | |
血清 | - | 15.6 | - | - |
15.6 | 30 | 14.4 | 92.3 | |
31.2 | 45 | 29.4 | 94.2 | |
39.1 | 51.4 | 35.8 | 91.6 | |
血漿 (EDTA) | - | 13 | - | - |
13.2 | 25.3 | 12.3 | 93.2 | |
19.9 | 32.8 | 19.8 | 99.5 | |
33.1 | 44 | 31 | 93.7 |
【結(jié)果】
均得到良好的回收率。
實(shí)際樣品的檢測
使用本產(chǎn)品檢測人血清/血漿、小鼠(ICR)血清/血漿樣品和大鼠(SD)血清/血漿。
人
樣品No. | 檢測值 (mg/dL) | 平均值 (mg/dL) | SD | CV(%) | ||
血清 | 1 | 58.2 | 57.9 | 58.1 | 0.2 | 0.37 |
2 | 44.1 | 45.2 | 44.7 | 0.8 | 1.7 | |
3 | 45.7 | 45.7 | 45.7 | 0 | 0 | |
4 | 35.3 | 34.3 | 34.8 | 0.7 | 2 | |
5 | 34.9 | 34.3 | 34.6 | 0.4 | 1.2 | |
血漿 | 1 | 104 | 105 | 105 | 0.71 | 0.68 |
2 | 44.7 | 45.5 | 45.1 | 0.57 | 1.3 | |
3 | 46.2 | 46.4 | 46.3 | 0.14 | 0.31 | |
4 | 34.5 | 35.3 | 34.9 | 0.57 | 1.6 | |
5 | 33.4 | 33.9 | 33.7 | 0.35 | 1.1 |
小鼠
樣品No. | 檢測值 (mg/dL) | 平均值 (mg/dL) | SD | CV(%) | ||
血清 | 1 | 74.1 | 76.2 | 75.2 | 1.5 | 2 |
2 | 71.9 | 71.7 | 71.8 | 0.14 | 0.2 | |
3 | 77.2 | 80.3 | 78.7 | 2.2 | 2.8 | |
4 | 86.5 | 87.7 | 87.1 | 0.85 | 0.97 | |
5 | 68.2 | 69.3 | 68.7 | 0.78 | 1.1 | |
血漿 | 1 | 40.6 | 40.3 | 40.5 | 0.21 | 0.52 |
2 | 25.5 | 26 | 25.8 | 0.35 | 1.4 | |
3 | 50.1 | 48.6 | 49.4 | 1.1 | 2.1 | |
4 | 27.2 | 28.9 | 28.1 | 1.2 | 4.3 | |
5 | 24.2 | 25.7 | 25 | 1.1 | 4.3 |
大鼠
樣品No. | 檢測值 (mg/dL) | 平均值 (mg/dL) | SD | CV(%) | ||
血清 | 1 | 22.5 | 20.5 | 21.5 | 1.4 | 6.6 |
2 | 31.8 | 30.7 | 31.3 | 0.78 | 2.5 | |
3 | 32.7 | 33.2 | 33 | 0.35 | 1.1 | |
4 | 22.4 | 22.5 | 22.5 | 0.071 | 0.31 | |
5 | 25.5 | 25.8 | 25.7 | 0.21 | 0.83 | |
血漿 | 1 | 13.2 | 13.3 | 13.3 | 0.071 | 0.53 |
2 | 13.3 | 13.1 | 13.2 | 0.14 | 1.1 | |
3 | 13.1 | 11.4 | 12.3 | 1.2 | 9.8 | |
4 | 13.6 | 13.6 | 13.6 | 0 | 0 | |
5 | 15.4 | 16.4 | 15.9 | 0.71 | 4.4 |
◆產(chǎn)品列表
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級(jí) |
299-96501 | LabAssay™ HDL-Cholesterol | 100 tests | 細(xì)胞生物學(xué)用 |
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635-50981 | LabAssay (TM) Cholesterol | 500 tests | - |
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