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詳細(xì)介紹
LabAssay™ Creatinine 
LabAssay™ 肌酐檢測試劑盒
肌酐是在肌肉和神經(jīng)中由磷酸肌酸直接產(chǎn)生或通過肌酸脫水產(chǎn)生的物質(zhì)。肌酐作為代謝廢物，被腎小球過濾并排出體外。本產(chǎn)品為通過Jaffé 反應(yīng)的高特異性肌酐檢測試劑盒，可通過微孔板法檢測小鼠血清和尿液中的肌酐。
◆檢測原理
向樣品中加入去蛋白試劑并沉淀后，取上清。當(dāng) kǔ wèi 酸作用于該上清時，樣品中的肌酐在堿性溶液中與 kǔ wèi 酸反應(yīng)產(chǎn)生橙紅色的縮合物（即Jaffé反應(yīng)）。通過測定這種橙紅色的吸光度，可計算樣品中肌酐的含量。
◆試劑盒組成
1．去蛋白試劑——150 mL×1瓶
2． kǔ wèi 酸試劑（ kǔ wèi 酸 22 mmol/L）——50 mL×1瓶
3．0.75 mol/L氫氧化鈉溶液——50 mL×1瓶
4．10 mg/dL肌酐標(biāo)準(zhǔn)溶液——15 mL×1瓶
◆試劑盒性能
● 標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍：2.5～10 mg/dL（mg/100mL）
● 檢測時間：約40 min
● 樣品：血清、血漿（小鼠、大鼠、人）
● 所需樣品量：50 μL
● 測定波長：520 nm
◆標(biāo)準(zhǔn)曲線示例
◆檢測操作方法
微孔板法
根據(jù)下表條件進(jìn)行反應(yīng)。
Tests | 標(biāo)準(zhǔn) | 空白 | |
第一步操作在樣品管內(nèi)完成 | |||
樣品 | 樣品50 μL | 標(biāo)準(zhǔn)溶液50 μL | 蒸餾水50 μL |
去蛋白試劑 | 300 μL | 300 μL | 300 μL |
充分混合。在室溫靜置10 min。以大于2500 rpm的轉(zhuǎn)速離心10 min。 后續(xù)操作在孔板中進(jìn)行。 | |||
上 清 | 100 μL | 100 μL | 100 μL |
在25℃～30℃下靜置 | |||
kǔ wèi 酸試劑 | 50 μL | 50 μL | 50 μL |
0.75mol/L氫氧化鈉溶液 | 50 μL | 50 μL | 50 μL |
在25℃～30℃下靜置20 min。 以空白為對照，30 min內(nèi)測定樣品及標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度（波長：520 nm） | |||
◆數(shù)據(jù)
加標(biāo)回收測試
肌酐的加標(biāo)回收測試，將已知含量的標(biāo)準(zhǔn)品加標(biāo)到人、小鼠、大鼠樣品中，n=2。
人樣品
人樣品 | 添加量（mg/dL） | 實測值（mg/dL） | 回收量（mg/dL） | 回收率 (%) |
血清樣品 | － | 3.68 | － | － |
2.71 | 6.37 | 2.7 | 99.6 | |
3.55 | 7.1 | 3.42 | 96.3 | |
4.21 | 7.55 | 3.87 | 91.9 | |
血漿樣品（EDTA） | － | 3.43 | － | － |
3.3 | 6.47 | 3.04 | 95.2 | |
4.33 | 7.39 | 3.96 | 91.5 | |
5.13 | 7.69 | 4.26 | 83 | |
血漿樣品（肝素） | － | 3.37 | － | － |
3.31 | 6.97 | 3.6 | 109 | |
4.34 | 7.86 | 4.49 | 103 | |
5.14 | 8.21 | 4.84 | 94.2 |
小鼠樣品
小鼠樣品 | 添加量（mg/dL） | 實測值（mg/dL） | 回收量（mg/dL） | 回收率 (%) |
血清樣品 | － | 2.68 | － | － |
3 | 5.9 | 3.22 | 107 | |
5.14 | 8.08 | 5.4 | 105 | |
6.74 | 8.9 | 6.22 | 92.3 | |
血漿樣品（EDTA） | － | 3.14 | － | － |
2.71 | 5.63 | 2.49 | 91.9 | |
4.65 | 7.74 | 4.6 | 98.9 | |
6.1 | 8.25 | 5.11 | 83.8 | |
血漿樣品（肝素） | － | 3.01 | － | － |
2.85 | 5.48 | 2.47 | 86.7 | |
4.88 | 7.74 | 4.73 | 96.9 | |
6.41 | 8.6 | 5.59 | 87.2 |
大鼠樣品
大鼠樣品 | 添加量（mg/dL） | 實測值（mg/dL） | 回收量（mg/dL） | 回收率 (%) |
血清樣品 | － | 2.86 | － | － |
3.27 | 5.61 | 2.75 | 84.1 | |
5.6 | 8.13 | 5.27 | 94.1 | |
7.35 | 9.34 | 6.48 | 88.2 | |
血漿樣品（EDTA） | － | 2.78 | － | － |
2.79 | 5.22 | 2.44 | 87.5 | |
4.78 | 8.3 | 5.52 | 115 | |
6.27 | 9.22 | 6.44 | 103 | |
血漿樣品（肝素） | － | 2.88 | － | － |
3.17 | 5.53 | 2.65 | 83.6 | |
5.43 | 8.25 | 5.37 | 98.9 | |
7.13 | 9.27 | 6.39 | 89.6 |
◆樣品檢測示例
人樣品
測定值（mg/dL） | 平均值 | SD | CV（%） | ||
人血清 | 3.69 | 3.67 | 3.68 | 0.012 | 0.33 |
人血漿（EDTA） | 3.43 | 3.44 | 3.43 | 0.0071 | 0.21 |
大鼠血清
序號 | 測定值（mg/dL） | 平均值 | SD | CV（%） | 備注 | |
1 | 0.553 | 0.546 | 0.55 | 0.0049 | 0.9 | 參考值 |
2 | 0.716 | 0.824 | 0.77 | 0.076 | 9.9 | 參考值 |
3 | 1.12 | 1.26 | 1.19 | 0.095 | 8 | 參考值 |
4 | 1.22 | 1.29 | 1.25 | 0.05 | 4 | 參考值 |
5 | 1.04 | 0.994 | 1.01 | 0.029 | 2.9 | 參考值 |
大鼠血漿（EDTA）
序號 | 測定值（mg/dL） | 平均值 | SD | CV（%） | 備注 | |
1 | 0.319 | 0.288 | 0.304 | 0.022 | 7.2 | 參考值 |
2 | 0.638 | 0.627 | 0.633 | 0.0078 | 1.2 | 參考值 |
3 | 0.824 | 0.871 | 0.848 | 0.033 | 3.9 | 參考值 |
4 | 0.661 | 0.681 | 0.671 | 0.014 | 2.1 | 參考值 |
5 | 0.205 | 0.233 | 0.219 | 0.02 | 9 | 參考值 |
小鼠血清
序號 | 測定值（mg/dL） | 平均值 | SD | CV（%） | 備注 | |
1 | 0.199 | 0.205 | 0.202 | 0.0042 | 2.1 | 參考值 |
2 | 0.492 | 0.507 | 0.5 | 0.011 | 2.1 | 參考值 |
3 | 0.734 | 0.722 | 0.728 | 0.0085 | 1.2 | 參考值 |
4 | 0.641 | 0.716 | 0.679 | 0.053 | 7.8 | 參考值 |
5 | 0.192 | 0.219 | 0.206 | 0.019 | 9.3 | 參考值 |
小鼠血漿（EDTA）
序號 | 測定值（mg/dL） | 平均值 | SD | CV（%） | 備注 | |
1 | 0.095 | 0.103 | 0.099 | 0.0057 | 5.7 | 參考值 |
2 | 0.607 | 0.559 | 0.583 | 0.034 | 5.8 | 參考值 |
3 | 0.556 | 0.528 | 0.542 | 0.02 | 3.7 | 參考值 |
4 | 0.49 | 0.546 | 0.518 | 0.04 | 7.6 | 參考值 |
5 | 0.113 | 0.11 | 0.112 | 0.0021 | 1.9 | 參考值 |
◆稀釋線性度測試
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| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 |
| 636-51011 | LabAssay™ Creatinine LabAssay™ 肌酐檢測試劑盒 | 500 tests |
※ 產(chǎn)品已更新，舊編號為：290-65901
參考文獻(xiàn)
1. | Kawamoto, T. et al. : Glycative Stress Res., 3, 15 (2016). Relationships between urinary melatonin metabolites and glycative stress and body functional age ※人尿 |
2. | Guan, Y. et al. : J. Pharmacol. Sci., 135, 81 (2017). A protease-activated receptor-1 antagonist protects against podocyte injury in a mouse model of nephropathy ※小鼠尿、血漿 |
3. | Ito, K. et al. : Biol. Pharm. Bull., 38, 1169 (2015). Increased Milk Protein Concentration in a Rehydration Drink Enhances Fluid Retention Caused by Water Reabsorption in Rats ※大鼠尿、血漿 |
4. | Ito, K. et al. : Biol. Pharm. Bull., 38, 1169 (2015). Increased Milk Protein Concentration in a Rehydration Drink Enhances Fluid Retention Caused by Water Reabsorption in Rats ※大鼠尿、血漿 |
5. | Ito, K. et al. : Biol. Pharm. Bull., 38, 1169 (2015). Increased Milk Protein Concentration in a Rehydration Drink Enhances Fluid Retention Caused by Water Reabsorption in Rats ※大鼠尿、血漿 |
6. | Toyama, K. et al. : Br. J. Pharmacol., 166, 1183 (2012). Loss of multidrug and toxin extrusion 1 (MATE1) is associated with metformin-induced lactic acidosis ※小鼠血漿 |
LabAssay™ 肌酐檢測試劑盒