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北京眾力挽生物科技有限公...

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實現(xiàn)更準確定量,熒光定量PCR儀指數(shù)期測量更*

閱讀:2532      發(fā)布時間:2020-2-21
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  基本PCR運行可以分為三個階段:指數(shù)期、線性期和平臺期,熒光定量PCR儀主要是在發(fā)生PCR擴增時進行測量。一般為定量,因為在PCR的指數(shù)(對數(shù))期內采集數(shù)據(jù),在此期間PCR產(chǎn)物的數(shù)量與核酸模板的量成正比。
  熒光定量PCR儀的應用十分廣泛,可以進行基因表達定量、芯片驗證、病原體檢測、SNP基因分型、拷貝數(shù)變異、microRNA分析、病毒定量、siRNA/RNAi實驗多種方向的研究測量。
 

熒光定量PCR儀

  1、提高檢測的動態(tài)范圍
  2、無需PCR后處理
  3、檢測能夠覆蓋低至2倍的變化
  4、在PCR的指數(shù)期內采集數(shù)據(jù)
  5、報告基團熒光信號的增加與生成的擴增子數(shù)量成正比
  6、裂解探針提供擴增子的裂解記錄
  熒光定量PCR儀集中于指數(shù)期,因為它可提供更加精確的數(shù)據(jù)進行定量。在指數(shù)期內,實時計算兩個數(shù)值。閾值線是反應的熒光強度超過背景時的檢測水平。樣品達到此水平的PCR循環(huán)稱為循環(huán)閾值(Ct)。Ct值用于下游定量或存在/缺失檢測。通過比較未知濃度的樣品與一系列標準品的Ct值,可以精確測定未知反應中的模板DNA數(shù)量。

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