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ABI 7500熒光定量PCR儀主要看這些性能參數(shù)

閱讀:2379      發(fā)布時間:2023-4-13
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  熒光定量PCR技術是一種敏感、精確、高通量的DNA檢測方法,廣泛應用于基因表達分析、突變檢測、病原體檢測等領域。ABI 7500熒光定量PCR儀是該技術的核心設備之一,它利用熒光染料與PCR產(chǎn)物結合的原理,通過檢測不同靶標DNA片段擴增的熒光信號強度,來定量分析樣品中特定基因的表達量或突變狀態(tài)。具體來說,PCR反應體系中添加特定的熒光探針或引物,當PCR產(chǎn)物達到一定濃度時,熒光信號將達到一個峰值,該峰值與樣品中所含的目標DNA的數(shù)量成正比。PCR儀通過光電倍增技術將熒光信號轉(zhuǎn)化為電信號,并對其進行數(shù)字化處理和分析,最終得出定量結果。
  
  熒光定量PCR儀一般由以下幾個組成部分構成:
  
  1、光源:用于提供激發(fā)熒光染料的光源,常見的有氘燈、LED等。
  
  2、探測系統(tǒng):用于檢測熒光信號的探測器和光電倍增管等,一般分為單色和多色兩種。
  
  3、控制系統(tǒng):用于控制PCR反應過程、采集數(shù)據(jù)并進行分析的計算機系統(tǒng)和軟件。
  
  4、溫度控制系統(tǒng):保證PCR反應在恒溫條件下進行,一般采用風扇、水浴等方式進行制冷和加熱。
 
  

ABI 7500熒光定量PCR儀
 

 

  ABI 7500熒光定量PCR儀的性能參數(shù)對實驗的準確性、重復性和靈敏度等方面都有著重要的影響。以下是常見的主要性能參數(shù):
  
  1、動態(tài)范圍:指熒光信號強度與靶標DNA數(shù)量之間的線性關系范圍,一般在菌落形成單位(CFU)或DNA的拷貝數(shù)上限和下限之間。
  
  2、靈敏度:指熒光信號強度的最小檢測限度,一般在菌落形成單位(CFU)或DNA的拷貝數(shù)上限和下限之間。
  
  3、特異性:指熒光信號只來自于PCR產(chǎn)物,而不受其他污染物的影響。
  
  4、重復性:指同一DNA樣品在不同試劑盒、批次、實驗人員、PCR反應條件等不同條件下測量得到熒光信號強度的一致性。
  
  5、穩(wěn)定性:指熒光定量PCR儀長時間使用時的靈敏度、特異性、穩(wěn)定度等參數(shù)是否符合要求。
  
  熒光定量PCR技術具有高的靈敏度和特異性,被廣泛應用于基因表達分析、突變檢測、病原體檢測等領域。其中主要包括以下幾個方面:
  
  1、表達定量:通過熒光定量PCR技術對比不同組織、不同時間點或不同處理方式下同一基因的表達量,從而分析該基因的生物功能與調(diào)控機制。
  
  2、突變檢測:通過熒光定量PCR技術檢測特定序列的丟失、插入、替換、錯配等突變型,從而篩選出潛在致病基因并進行相關疾病的診斷。
  
  3、病原體檢測:通過熒光定量PCR技術檢測樣品中的病原體DNA,從而診斷感染性疾病的病因和病情。
  
  4、藥物篩選:通過熒光定量PCR技術檢測細胞在藥物處理后特定基因的表達變化,從而篩選出適合于治療特定疾病的藥物。
  
  作為一種敏感、精確、高通量的DNA檢測方法,熒光定量PCR技術在生物醫(yī)學領域具有廣泛的應用前景。ABI 7500熒光定量PCR儀作為該技術的核心設備之一,其性能參數(shù)對實驗的準確性、重復性和靈敏度等方面都有著重要的影響。未來,隨著熒光定量PCR技術和熒光定量PCR儀的不斷改進和發(fā)展,相信這一領域?qū)玫礁訌V泛的應用。

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