Leica倒置顯微鏡是一種特殊設(shè)計(jì)的顯微鏡,其物鏡位于載物臺下方,而光源和聚光器位于載物臺上方,與普通顯微鏡結(jié)構(gòu)相反。這種設(shè)計(jì)使其特別適用于觀察培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶中的活細(xì)胞及較厚的生物樣本,在細(xì)胞生物學(xué)、組織工程、藥物篩選等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。
倒置顯微鏡的核心優(yōu)勢在于其長工作距離物鏡,能夠直接對培養(yǎng)容器中的細(xì)胞進(jìn)行觀察,無需將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至載玻片,減少了樣本處理步驟,更有利于保持細(xì)胞的活性與自然狀態(tài)。同時,倒置顯微鏡支持多種觀察模式,如明場、相差、熒光、微分干涉(DIC)等,可滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求。例如,相差觀察無需染色即可清晰呈現(xiàn)活細(xì)胞結(jié)構(gòu),熒光觀察則可對特定蛋白或細(xì)胞器進(jìn)行標(biāo)記分析。
Leica倒置顯微鏡的技術(shù)特點(diǎn)主要體現(xiàn)在以下幾個方面:
1、光學(xué)系統(tǒng)
優(yōu)質(zhì)鏡頭:采用高分辨率、高數(shù)值孔徑的物鏡和目鏡,能夠提供清晰、銳利的圖像,細(xì)節(jié)還原度高,有助于觀察微小結(jié)構(gòu)和細(xì)胞內(nèi)的細(xì)節(jié)變化。例如,在觀察細(xì)胞切片時,能清晰地分辨出細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)中的細(xì)胞器等結(jié)構(gòu)。
長工作距離:物鏡和聚光鏡采用長工作距離設(shè)計(jì),這使得在觀察培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶等容器中溶液里的細(xì)胞或微生物時,物鏡不易與容器接觸,可避免對樣本造成損傷,同時也方便進(jìn)行活細(xì)胞觀察和實(shí)時成像等操作。
多種照明方式:通常配備底部照明或側(cè)面照明,光線均勻且能有效減少照射光線對樣品的傷害4。部分型號還具有反射式照明系統(tǒng),通過反射鏡和激光等光源照射到樣品上,可獲得更清晰、高對比度的影像,適用于觀察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)和微小顆粒。
2、機(jī)械結(jié)構(gòu)
穩(wěn)固支架:支架設(shè)計(jì)穩(wěn)固,能夠承受一定重量的樣本,并確保在使用過程中不會晃動或移位,為觀察提供穩(wěn)定的支撐,保證成像質(zhì)量。
精細(xì)調(diào)焦:調(diào)焦系統(tǒng)通常采用精密的齒輪結(jié)構(gòu),使焦距調(diào)節(jié)更加精細(xì),用戶能夠輕松獲取清晰的觀察效果,無論是對不同厚度的樣本進(jìn)行聚焦,還是在觀察過程中進(jìn)行微調(diào),都能準(zhǔn)確操作。
人性化設(shè)計(jì):如Leica DMi3000 B研究級倒置顯微鏡,其鏡筒觀察角度可調(diào),用戶可根據(jù)自身需求調(diào)整至最佳觀察姿勢;載物臺驅(qū)動裝置和調(diào)焦旋鈕的布局合理,方便單手操作,且能防止相互干擾。
3、功能特性
模塊化設(shè)計(jì):如Leica DMi8等型號是高度模塊化倒置式研究顯微鏡,可根據(jù)用戶的具體需求和應(yīng)用,靈活添加或更換不同的功能模塊,如熒光模塊、微分干涉對比(DIC)模塊等,滿足多種實(shí)驗(yàn)需求。
多種觀察方法:支持明場、暗場、相位對比、微分干涉對比(DIC)、熒光和調(diào)制對比等多種對比方法,并且可快速切換,為用戶提供豐富的觀察手段,以適應(yīng)不同類型的樣本和研究目的。
智能軟件支持:配備專業(yè)的圖像采集和分析軟件,如Leica Application Suite(LAS)X軟件,可對圖像進(jìn)行實(shí)時采集、處理、分析和存儲,還能實(shí)現(xiàn)自動化操作和定量分析,提高研究效率和準(zhǔn)確性。
4、樣本適應(yīng)性
大樣本觀察優(yōu)勢:由于光學(xué)元件位于載物臺下方,工作距離較大,可對大型和重型樣本進(jìn)行成像,相比正置顯微鏡,在處理較大且較重的樣本,或樣本尺寸和重量差異較大時,具有更大的自由度。
減少樣本制備:只需制備樣本的一側(cè),即可更輕松地對大型樣本成像,節(jié)省了樣本制備的時間和成本,例如在材料科學(xué)和工業(yè)制造中觀察大型零件或零部件時,無需對樣本進(jìn)行復(fù)雜的包埋和切割等處理。
5、操作便捷性
簡單易用:操作相對簡單,只需將樣本擺放于載物臺上,對焦表面進(jìn)行成像即可,所有其他樣本的焦距可保持不變,減少了操作步驟和時間,即使是未經(jīng)培訓(xùn)的操作員也能較快上手。
安全保護(hù):物鏡位于載物臺下方,得到了更多的保護(hù),降低了物鏡壓迫樣本的風(fēng)險(xiǎn)1。部分型號還具有上方對焦停止功能,通過定義轉(zhuǎn)換器的上止點(diǎn)來提供額外的安全性,避免對樣本和物鏡造成損壞。
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