液相色譜儀檢測牛奶中氯霉素

      氯霉素是一種抗生素，對傷寒、百日咳、肺炎等具有良好的治療作用，但長期使用可引發(fā)再生障礙性貧血，因而監(jiān)控其在動物源食品中的殘留對開展畜產(chǎn)品檢測及保障食品安全工作有重大意義，可采用液相色譜儀檢測牛奶中氯霉素。

液相色譜儀檢測牛奶中氯霉素儀器設(shè)備

液相色譜儀

紫外檢測器，

SPE固相萃取裝置

氮吹儀

超聲清洗儀

渦旋振蕩儀

離心機(jī)

試劑材料濃縮奶；氯霉素標(biāo)品；甲醇（色譜純）；乙腈（分析純）；乙酸乙酯（分析純）。

色譜柱：C18（5 μm，120 Å，4.6×250 mm，）

液相色譜儀檢測牛奶中氯霉素樣品制備

準(zhǔn)確稱取牛奶5 g（到0.001），加入乙酸乙酯15 mL，渦旋振蕩1 min，搖床振蕩10 min。3000 r/min離心10 min。將上清轉(zhuǎn)移至試管，于45 ℃氮吹儀吹干，用5 mL乙腈-水溶液（5 : 95，v/v）再溶解，超聲10 min，待凈化。
SPE柱凈化

1. 活化：C18固相萃取柱使用前依次用5 mL甲醇、5 mL水活化。
2. 上樣：將待凈化液加入已活化好的固相萃取柱中，以1 mL/min的流速過柱，棄去濾液。
3. 淋洗：用4 mL×2次乙腈-水溶液（5 : 95，v/v）淋洗固相萃取柱，棄去淋洗液，抽干10 min。
4. 洗脫：用8 mL乙酸乙酯洗脫固相萃取小柱，收集洗脫液。
5. 重新溶解：洗脫液于45℃氮吹吹干，加1 mL乙腈-水溶液（2 : 8，v/v），超聲10 min溶解，0.45 μm微孔濾膜過濾，供液相色譜儀測定。
   
   

色譜條件

色譜柱：C18（5 μm ，120 Å，4.6×250 mm，）

檢測器：UV3000型紫外/可見光檢測器

檢測波長：UV 268 nm 

流動相：甲醇/水 = 60/40（v/v）          

流速：0.8 mL/min

柱溫：25 ℃                   

進(jìn)樣量：20 μL

采用此方法進(jìn)行奶制品中氯霉素含量的液相測試，添加回收率達(dá)到97.24%，表明AE.SPE-C18 及C18適于乳制品中氯霉素的純化和測試。