亮發(fā)光桿菌zui初的生長是在非選擇性瓊脂培養(yǎng)基上。除非特殊情況或特別推薦,zui初的生長一般不考慮液體培養(yǎng)基。這是由于在液體培養(yǎng)基中獲得凍干菌株的純種比較困難,污染所帶來的雜菌可能會過度生長,影響得到目標菌株的純種。
以下列出可供選擇的瓊脂培養(yǎng)基和相應的生長條件,供各實驗室培養(yǎng)菌種時參考。
方法1
胰蛋白胨大豆瓊脂,非選擇性羊血瓊脂,標準計數(shù)平板,或營養(yǎng)瓊脂——35℃,正常環(huán)境,24-48小時。
方法2
非選擇性羊血瓊脂——35℃,正常環(huán)境,24~48小時。在培養(yǎng)鏈球菌屬和隱秘桿菌屬時,CO2環(huán)境可提高其生長。推薦使用5%CO2環(huán)境來培養(yǎng)肺炎鏈球菌和其他甲型溶血性鏈球菌。
方法3
巧克力瓊脂——35℃,5%~10%的CO2環(huán)境,24-48小時。
方法4
厭氧血瓊脂——35℃,厭氧環(huán)境,48-72小時;
部分專性厭氧菌可能需要5~7天,才能充分生長;
對于梭菌,以下新鮮配制的平板也可選用:營養(yǎng)瓊脂,胰蛋白胨大豆瓊脂和標準平板計數(shù)瓊脂(標準方法瓊脂);只是需額外培養(yǎng)24小時。
方法5
沙保氏葡萄糖 Emmons瓊脂——25℃,正常環(huán)境,2~7天;
非選擇性羊血瓊脂也可選用 ;
以下培養(yǎng)基也可選用:營養(yǎng)瓊脂,胰蛋白胨大豆瓊脂,馬鈴薯葡萄糖瓊脂和標準平板計數(shù)瓊脂,只是需額外培養(yǎng)24小時。
方法6
巧克力瓊脂——35℃,微需氧環(huán)境,48-72小時。
方法7
Lowenstein Jensen瓊脂或Middlebrook瓊脂——35℃,5%~10%CO2環(huán)境或正常環(huán)境,7天。M. fortuitum subsp.
fortuitum, M. peregrium 和M. smcgmatis也可以選用胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)和Lowenstein Jensen瓊脂或Middlebrook瓊脂一樣,只是需額外培養(yǎng)一些時間。
方法8
緩沖活性炭酵母提取物瓊脂——35℃,正常環(huán)境,3-5天。
方法9
V瓊脂或巧克力瓊脂——35℃,5%~10%,CO2環(huán)境,48小時。
方法10
菌種水解可選用無菌腦心浸出液肉湯,胰蛋白胨大豆肉湯,或0.85%生理鹽水。無菌水水解可能會導致活力下降或不復蘇。在KWIK-STIK包裝中自帶的培養(yǎng)基使得菌種很好的復蘇。
在胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)上生長——35℃,正常環(huán)境,24-48小時。Vibro SP.也可在Marine瓊脂上生長。
方法11
亮發(fā)光桿菌先接種于MRS肉湯中——35℃,正常環(huán)境,48小時;
然后接入含羊血的哥倫比亞CNA培養(yǎng)基中——35℃,5-10%CO2環(huán)境,48小時。
方法12
馬鈴薯葡萄糖瓊脂——55℃,正常環(huán)境,48小時。
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亮發(fā)光桿菌
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