傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀(guān)察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

HNEPC人鼻粘膜上皮細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀(guān)察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(mǎn)至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

SELPLG Others Human 人 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 兔基質(zhì)金屬蛋白9(MMP-9)ELISA試劑盒 Goat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1ml

phospho-FXYD1 (Ser83)： 0酸化0酸神經(jīng)膜抗體 人腦血管平滑肌細(xì)胞RNAHBCSMC miRNA5 μg

EJ細(xì)胞，人膀胱癌細(xì)胞 小鼠成纖維細(xì)胞系,McCoy細(xì)胞 人少突膠質(zhì)細(xì)胞 兔肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA 試劑盒 Goat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1ml

Phospho-FGFR1+FGFR2 (Tyr463)： 0酸化堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體 TNFRSF9 Others Human 人 4-1BB / CD137 / TNFRSF9 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 兔環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA 試劑盒 Goat Anti-rat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1ml

B16-F10小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞 B16-F10 mouse melanoma cell DMEM培養(yǎng)基+10%FBS 大鼠微管關(guān)聯(lián)蛋白τ(MAPτ)ELISA試劑盒 TGF- Alpha(Human transforming growth factor Alpha)  人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α 96T

Phospho-MKP1 (Ser318)： 0酸化原活化蛋白激酶0酸酶1抗體 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0239U-937(人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠微管關(guān)聯(lián)蛋白4(MAP4)ELISA試劑盒 N-AChR  大鼠型乙酰受體 48T96T

Metabotropic glutamate receptor 2： 促代謝型谷酸受體2抗體 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類(lèi));F9-CAG-tTA-3E5

PLC/PRF/5(人肝癌亞力山大細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚腎細(xì)胞) 大鼠微管蛋白β3(TUBB3)ELISA試劑盒 ODF(Mouse osteoclast differentiation factor)  小鼠破骨細(xì)胞分化因子 96T

HNEPC人鼻粘膜上皮細(xì)胞Involucrin： 囊包蛋白/內(nèi)披蛋白抗體 SCARB2 Others Mouse 小鼠 SCARB2 / LIMP2 / CD36L2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠T淋巴細(xì)胞;Cl.Ly1+2-/9 人補(bǔ)體片段3c(C3c)ELISA 試劑盒 LH(Luteinizing Hormone) 促黃體生成素抗原 0.5mg

Insulin Receptor R： 胰島素受體相關(guān)受體抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1002

OP9(小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 CD8B / P37 / LEU2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA 試劑盒 LH(Luteinizing Hormone) 人促黃體生成素(多肽) 0.5mg

INCA1： INCA1蛋白抗體 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞HUMSC