傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

calu-6人退行性癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

MX-1細(xì)胞，人癌細(xì)胞 豬腎細(xì)胞系,PK-15細(xì)胞 大隱靜脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 人游離狀腺原酸(Free-T3)ELISA 試劑盒 IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 0.1ml

GluA4： 離子型谷酸受體4抗體 CA9 Others Mouse 小鼠 CAR9 / CAIX / CA9 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0269CW-2(人結(jié)腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA 試劑盒 IgG/PE PE標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 0.1ml

phospho-GluA4 (Ser862)： 0酸化離子型谷酸受體4抗體 EC109，人食管癌細(xì)胞 Human

HUtMEC Pellet 人子宮微血管內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 肌細(xì)胞分離液MDS 人游離甲狀腺素(FT4)ELISA 試劑盒 IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 0.1ml

Nidogen： 巢蛋白1抗體 KITLG Others Human 人 SCF / C-kit ligand (aa 1-189 ) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠子宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA 試劑盒 大鼠Smad7  大鼠Smad7 96T

NPFF： 痛覺(jué)調(diào)節(jié)肽NPFF抗體 YAC-1細(xì)胞，淋巴瘤細(xì)胞 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞,HT-29細(xì)胞 CM-H021人前列腺平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

KDR Others Rat 大鼠 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠雙氧化酶2(DUOX2)ELISA試劑盒 26S PSM  大鼠26S蛋白酶體 96T

Neurotensin： 神經(jīng)緊張素抗體 雪旺細(xì)胞培養(yǎng)基SCM-prf

calu-6人退行性癌細(xì)胞人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA 試劑盒 RASSF1A(Ras association domain family 1A) Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗原 0.5mg

phospho-IKK gamma(Ser43)： 0酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體 恒河猴皮膚細(xì)胞;RM-S1 人結(jié)腸癌細(xì)胞，LoVo細(xì)胞 TE-1(食管癌細(xì)胞)

CD7 Others Rat 大鼠 CD7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)ELISA 試劑盒 Resistin 抵抗素抗原 0.5mg

phospho-IL-1R1(Tyr496)： 0酸化白介素1受體1抗體 恒河猴腎細(xì)胞;RM-1

EL4.IL-2細(xì)胞，小鼠淋巴瘤細(xì)胞 Mo-MuLv/3T3(Mo-MuLv感染的3T3細(xì)胞) 人皮膚成纖維樣細(xì)胞;HSF2 人β2糖蛋白(β2-GP)ELISA 試劑盒 RGS2 peptide G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗原 0.5mg