傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

WERI-RB-1人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應(yīng)盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

NHDF adult Pellet 正常人皮膚成纖維細胞團塊(捐獻者) > 1 mio.cells CCCSCK 人異常原(APT)ELISA 試劑盒 IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的小鼠抗IgG 0.1ml

phospho-GABRG2(Ser366)： 0酸化γ基γ2受體抗體 小鼠淋巴細胞白血病;L1210

293E(人胚腎細胞(EBNA1基因修飾)) 5×106cells/瓶×2 人異(iso-Hyd)ELISA 試劑盒 IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的小鼠抗IgG 0.1ml

GABRG3： G基受體γ3/GABAA Rγ3抗體 Spike Others SARS SARS Spike S1 Subunit 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人肺動脈成纖維細胞cDNAHPAF cDNA 人乙型腦炎病毒抗體(JE-Ab)ELISA試劑盒 IgG/APC APC標記的小鼠抗IgG 0.1ml

NEK7： 絲酸/蘇酸蛋白激酶Nek7抗體 口腔角質(zhì)細胞培養(yǎng)基OKM

F9小鼠畸胎瘤細胞 F9 mouse teratoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS 大鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)ELISA試劑盒 CD20(Rat Troponin T)  小鼠CD20分子 96T

NPTX1： 神經(jīng)細胞正五聚體1抗體 VLDLR Others Human 人 VLDLR / VLDL Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照)

T-108A膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL 大鼠嗜鉻蛋白B(CHGB)ELISA試劑盒 PDGF-BB  大鼠血小板衍生生長因子BB 96T

NNT： 酰胺核苷酸轉(zhuǎn)氫酶抗體 大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-1

WERI-RB-1人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞B16F10細胞，小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細胞 FRhK-4(恒河猴胚腎細胞) SV40轉(zhuǎn)染人成骨細胞;hFOB 1.19 人α半乳糖基抗體(Gal)ELISA 試劑盒 SFRP1(Secreted frizzled related protein 1) 分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗原 0.5mg

IKBKE： 核因子κB抑制蛋白E抗體 ICOS Others Human 人 ICOS / AILIM / CD278 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胚肺成纖維細胞;MRC-5 人α半乳糖苷酶(αGAL)ELISA 試劑盒 SGLT1(sodium-glucose cotransporter1) -葡萄糖共轉(zhuǎn)運載體1抗原 0.5mg

phospho-ITGB4(Tyr1494)： 0酸化整合素β4抗體 人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS

SHG-44 (人膠質(zhì)瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 人αN已酰基葡糖苷酶(αNAG)ELISA 試劑盒 Shadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor) 新朊蛋白/朊蛋白相關(guān)蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗原 0.5mg