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參考價 | ¥1500-¥3800 | /件 |
參考價:¥1500 ~ ¥3800
更新時間:2024-12-05 15:10:20瀏覽次數:252評價
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供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 1×106cells |
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貨號 | E-XB6630 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 組織來源 | 腎小球系膜細胞 |
種屬來源 | 小鼠 |
SV40-MES-13小鼠腎小球系膜細胞
細胞基本屬性:
產品名稱 | SV40-MES-13小鼠腎小球系膜細胞 | 年齡性別 | 7-10周齡 |
種屬 | 小鼠 | 組織來源 | 腎小球系膜細胞 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細胞代數 | 10代以內 | 凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
細胞詳細介紹:
細胞別稱 SV40-MES-13;SV40-MES13; MES-13; MES 13; MES13;小鼠腎小球系膜細胞 細胞代數;10代以內 背景介紹;SV40 MES 13細胞系來源于轉染SV40的轉基因小鼠的腎臟。SV40 MES 13細胞的細胞骨架染色突出呈現肌動蛋白,在細胞質中有豐富的平行微絲。有報道稱,在1uM血管緊張素Ⅱ存在下,SV40 MES 13細胞會收縮。SV40 MES 13細胞在軟瓊脂中形成克??;SV40大T抗原陽性。 生物安全等級;2 細胞規(guī)格;1x106cells/T25或1mL凍存管 支原體檢測;無 保藏機構;ATCC; CRL-1927 培養(yǎng)基;DMEM/F12+10% FBS+PS 培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 凍存條件無血清凍存液,液氮儲 發(fā)貨方式復蘇發(fā)貨(免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞 供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 特別說明以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 |
二、懸浮細胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下)。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經長滿至80%~90%(細胞懸液變黃)時,即可進行傳代。
(1)嚴格進行無菌操作,所用一切試劑及耗材均應無菌,且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,以免細胞發(fā)生污染。
(2)所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞,對培養(yǎng)液的要求不一樣,必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養(yǎng)液。
(3)胎牛血清對于維持細胞生存,促進細胞生長起著關鍵作用??筛鶕墨I或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應保持用至實驗完成。
(4)消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數量少,或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離,這時的細胞已有損傷或死亡,影響細胞數量和實驗進度。
(5)細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數量不夠,或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后,應先彈散細胞沉淀,再加入培養(yǎng)液重懸,這樣比直接吹打對細胞損傷小,可以提高細胞活率。
(6)吹打細胞時應盡量避免細胞的產生,以免損傷細胞,影響細胞狀態(tài)(吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生)。
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傳代培養(yǎng)操作步驟:
一、貼壁培養(yǎng)
細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度,當細胞生長密度達到80%~90%時,即可進行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據培養(yǎng)瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的,一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。
(4)把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發(fā)現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時,再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落,然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過度。
(5)吸出所有細胞懸液至離心管內,1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養(yǎng)液重懸細胞,輕輕吹打混勻,使細胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,補足培養(yǎng)液,搖勻,放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
(8)根據細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間,甚至進行細胞凍存。