目錄:上海一研生物科技有限公司>>原代細(xì)胞>>人原代細(xì)胞>> 人原代真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞
參考價(jià) | ¥2600-¥6000 | /件 |
參考價(jià):¥2600 ~ ¥6000
更新時(shí)間:2024-12-05 21:26:59瀏覽次數(shù):242評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
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貨號(hào) | EY-XY3224 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
細(xì)胞形態(tài) | 多角形細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 手術(shù)切除的正常包皮組織 |
種屬來(lái)源 | 人 |
人原代真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | 人原代真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 手術(shù)切除的正常包皮組織 |
種屬 | 人 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
形態(tài)特征 | 多角形細(xì)胞 | 英文名稱 | 詳見(jiàn)說(shuō)明 |
貨號(hào) | EY-XY3224 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
細(xì)胞鑒定:vWF免疫熒光染色為陽(yáng)性。
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:人原代真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件:無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
細(xì)胞代數(shù):第1代
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右
運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹:
皮膚指身體表面包在肌肉外面的組織,是人體最大的器官,主要承擔(dān)著保護(hù)身體、排汗、感覺(jué)冷熱和壓力等功能。皮膚由表皮、真皮和皮下組織構(gòu)成。 微血管內(nèi)皮細(xì)胞受損已被視為創(chuàng)傷、感染、休克、腫瘤、血管疾病等多種疾病和綜合癥發(fā)生發(fā)展的病理基礎(chǔ)。一旦微血管內(nèi)皮細(xì)胞受損,必然影響甚至破壞微血管內(nèi)皮細(xì)胞正常的生物學(xué)功能,引起多種疾病的發(fā)生。微血管內(nèi)皮細(xì)胞間連接與血管通透性有著非常密切的關(guān)系。微血管內(nèi)皮細(xì)胞合成與分泌前列環(huán)素、一氧化氮、內(nèi)皮源性超極化因子和內(nèi)皮素等物質(zhì),來(lái)維持血管的正常狀態(tài)。 |
原代細(xì)胞的分離培養(yǎng):
原代培養(yǎng)即直接從有機(jī)體取下細(xì)胞、組織或器官,讓它們?cè)隗w外維持與生長(zhǎng)。原代培養(yǎng)的特點(diǎn)是細(xì)胞或組織剛離開(kāi)機(jī)體,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們?cè)隗w內(nèi)的狀態(tài),表現(xiàn)出來(lái)源組織或細(xì)胞的特性, 因此用于藥物實(shí)驗(yàn),尤其是藥物對(duì)細(xì)胞活動(dòng)、結(jié)構(gòu)、代謝、有無(wú)毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
(一)組織塊培養(yǎng)法
許多實(shí)驗(yàn)室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng),因?yàn)榉椒ê?jiǎn)單,細(xì)胞也較容易生長(zhǎng)。尤其是培養(yǎng)心肌,有時(shí)還可觀察到心肌組織塊搏動(dòng)。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長(zhǎng)出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后, 即可進(jìn)行傳代。
1. 設(shè)備材料
培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺(tái)/無(wú)菌間、無(wú)菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
(1) 在無(wú)菌條件下,取待培養(yǎng)的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。
(2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。
(3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
(4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液。
(5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,吸去多余的培養(yǎng)液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標(biāo)記, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。
(6) 2~4h 后,于超凈工作臺(tái)中,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,以使組織塊浸沒(méi)在培養(yǎng)液中。
(7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱, 如無(wú)特殊情況,不必觀察。1~2 周后,可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長(zhǎng)出,形成生長(zhǎng)暈。
(9) 一般說(shuō)來(lái),若培養(yǎng)液無(wú)明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細(xì)胞長(zhǎng)滿整個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)表面,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
操作方法:
組織塊直接培養(yǎng)法(原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn))
材料與儀器
【動(dòng)物】選擇大約一半足孕時(shí)間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞,成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個(gè)【實(shí)驗(yàn)材料】每組的超凈臺(tái)中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個(gè);3、50ml離心筒2個(gè)4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)5、1ml,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;8、酒精燈1臺(tái);
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動(dòng)物(倉(cāng)鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個(gè)胚胎轉(zhuǎn)移至一個(gè)小的無(wú)菌培養(yǎng)皿中,用新的無(wú)菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在無(wú)菌狀態(tài)下,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無(wú)菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無(wú)菌,用攪拌棒輕輕攪動(dòng)。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動(dòng)15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無(wú)菌50ml的離心管中,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見(jiàn)前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來(lái)的50ml離心筒中,重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細(xì)胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。8)用新鮮的無(wú)菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞,按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止。
公司正在出售的產(chǎn)品:
液泡蛋白分選受體SORCS3抗體
石蠟切片組織GSK-3BETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次
Mouseβ-galactosidase,βGALELISAKit小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanProteoglycan,PGELISA試劑盒人蛋白聚糖(PG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumaNFαconveingenzyme,TACEELISAKit人壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒 ,英文名: LTD4 ELISA Kit
番茄特定基因序列(PG)檢測(cè)試劑盒 48T
Huma-cellacelymphoblasticleukemiaaigen,TALLA-1ELISA試劑盒人T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原(TALLA-1/CD231)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
ELISAKitNSE小鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶規(guī)格:48T/96T
HumanArginase,ArgELISAKit人精酶(Arg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人輪狀病毒抗原(RV Ag)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細(xì)胞角蛋白18(CK-18)免疫試劑盒 Human CK-18 ELISA Kit
谷酰胺合成酶(GS)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
RatovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISA試劑盒大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
humanHypotheticalproteinLOC677168ELISA試劑盒人假定蛋白LOC677168ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanmailysin,MATELISAKit人基質(zhì)裂解蛋白/基質(zhì)溶素(MAT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
周期素依賴性激酶8抗體
核DNA結(jié)合蛋白C1D抗體
三羧酸載體樣蛋白3抗體
NFKB激活蛋白1抗體
腺病毒早期E1A蛋白抗體
胞脫氨酶抗體
磷酸化蛋白激酶C/p-PKC ε抗體
人原代真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族12成員A抗體
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)