上海申知心生物科技有限公司

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ROS活性氧檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
ROS活性氧檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
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更新時(shí)間：2023-08-29 10:34:51瀏覽次數(shù)：1904

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【簡(jiǎn)單介紹】
產(chǎn)地類(lèi)別 國(guó)產(chǎn) 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)
根據(jù)活細(xì)胞中紅色熒光的產(chǎn)生，可以判斷細(xì)胞R0S含量的多少和變化。二氫乙啶在細(xì)胞內(nèi)主要被超氧陰離子型ROS氧化，用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可直接觀察，是一種快速簡(jiǎn)便的組織或培養(yǎng)活細(xì)胞中ROS經(jīng)典檢測(cè)方法。
【詳細(xì)說(shuō)明】

活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過(guò)氧化氫、及其下游產(chǎn)物過(guò)氧化物和羥化物等，參與細(xì)胞生長(zhǎng)增殖、發(fā)育分化、衰老和周亡以及許多生理和病理過(guò)程。DHE活性氧檢測(cè)試劑盒是一種利用熒光探針DHE(Dihydroethidium)進(jìn)行活性氧檢測(cè)的，DHE可自由透過(guò)活細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，并被細(xì)胞內(nèi)的ROS氧化，形成氧化乙啶;氧化乙啶可摻入染色體DNA中，產(chǎn)生紅色熒光。

在激發(fā)波長(zhǎng)535nm,發(fā)射波長(zhǎng)610 nm附近，使用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀、流式細(xì)胞儀等檢測(cè)熒光，從而測(cè)定細(xì)胞內(nèi)活性氧水平。

DHE探針標(biāo)記:

1、DHE溶液可在新鮮培養(yǎng)液、緩沖鹽溶液或組織灌流液中稀釋到所需濃度，100-1000倍稀釋?zhuān)?以此染色液更換細(xì)胞培養(yǎng)液或灌流液;也可直接向細(xì)胞孵育液體或灌流液中加入DHE探針溶液至所需濃度。

2、依據(jù)細(xì)胞ROS含里的不同，DHE終濃度可選擇在100-1000倍稀釋的范圍，孵育

時(shí)間可選擇10-90分鐘，在37C或室溫進(jìn)行避光孵育。

3、孵育結(jié)束后用新鮮溶液清洗細(xì)胞或組織.



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