導 讀

2020版《中國藥典》已于今年6月正式發(fā)布，并將于12月30日起開始實施。2020版與此前版本的藥典相比，有多處重要的增刪與修改，四部新增《9306 遺傳毒性雜質控制指導原則》為其中之一。該指導原則的出現，為遺傳毒性雜質的控制提供了理論依據。據此，藥典二部又在十種藥物項下規(guī)定了對磺酸烷基酯類和N-亞硝胺類遺傳毒性雜質的監(jiān)控要求。如何建立遺傳毒性雜質的監(jiān)控能力成為一些制藥企業(yè)與檢測機構必須完成的挑戰(zhàn)，需盡早做好相應準備。 

什么是遺傳毒性雜質，新版藥典為什么要加入這些內容，具體都有哪些規(guī)定呢？讓小編為你一一解讀。

 新版藥典遺傳毒性雜質內容的解讀

根據新版藥典的定義，遺傳毒性雜質（genotoxic impurities）是指能引起遺傳毒性的雜質，包括致突變性雜質和其他類型的無致突變性雜質。其主要來源于原料藥或制劑的生產過程，如起始原料、反應物、催化劑、試劑、溶劑、中間體、副產物、降解產物等。

新版藥典之所以要增加遺傳毒性雜質的內容是為了加強標準協(xié)調，參考了人用藥品注冊技術要求協(xié)調會（ICH）相關指導原則。

藥典四部新增《9306 遺傳毒性雜質控制指導原則》，用于指導藥物遺傳毒性雜質的危害評估、分類和限制規(guī)定，以控制藥物中遺傳毒性雜質潛在的致癌風險，為藥品標準制修訂，上市藥品安全性再評估提供參考。

藥典二部有10種藥物明確指出在必要時，應采用適宜的分析方法對產品進行分析，以確認相關遺傳毒性雜質的含量符合我國藥品監(jiān)管部門相關指導原則或ICH M7指導原則的要求。這10種藥物關于遺傳毒性雜質的規(guī)定列表如下：

為了更好的推進磺酸烷基酯及N-亞硝胺的檢測方法，島津根據相關標準開發(fā)了多種檢測方案。

 島津解決方案之磺酸烷基酯篇

磺酸烷基酯

磺酸烷基酯一般是在磺酸鹽類藥物生產過程中產生的，2007年6月制藥*羅氏制藥公司在歐盟國家銷售的一種抗HIV藥物甲磺酸奈非那韋某些批次檢出了甲磺酸乙酯，該事件導致此種藥物在歐盟市場一度停售，直到羅氏修正了工藝并增加對甲磺酸乙酯的控制，此后多個國家及組織均加強了對磺酸烷基酯的監(jiān)控。

磺酸烷基酯結構，R1為甲基、苯基或甲苯基，R2為烷基

磺酸烷基酯的分類

不同的磺酸鹽藥物中需要檢測的磺酸烷基酯的種類是不同的，下表羅列了各種磺酸鹽原料藥需要檢測的磺酸烷基酯的種類。

方案1   頂空+色相色譜質譜

島津HS-20+ GC-MS分析系統(tǒng)

島津頂空自動進樣器特點主要有：

•均一穩(wěn)定的恒溫控制技術，的重現性

•加熱爐可以位重疊加熱，提高分析效率

•混合振蕩功能，可使樣品快速達到平衡，縮短分析時間

各磺酸烷基酯衍生物SIM色譜圖

方法原理：在頂空條件下使用碘化鈉將磺酸烷基酯衍生為的碘代烷烴，然后使用氣質檢測。

方法特點：前處理簡單，對儀器污染小，但不能同時檢測不同類的磺酸烷基酯。

方案2  氣相色譜質譜

島津GC-MS分析系統(tǒng)

島津氣質特點主要有：

•高靈敏度抗污染型離子源，良好的穩(wěn)定性

•強勁大容量真空系統(tǒng)，大幅度縮短質譜開機后的穩(wěn)定(抽真空)時間

•OD Lens雙偏轉透鏡，聚焦目標離子，減低噪音

八種磺酸酯標準品TIC色譜圖

方法原理：藥品溶于乙酸乙酯后有機濾膜過濾，直接采用氣質檢測。

方法特點：可以同時檢測不同類的磺酸烷基酯，基質復雜樣品檢測效果可能欠佳。

方案3  三重四極桿氣相色譜質譜

島津GCMSMS分析系統(tǒng)

GCMSMS NX系列氣質還具有以下特點：

•ClickTek技術儀器維護更方便

•新一代AFC全惰性流路，提供更高的檢測精度

•智能鐘、Smart EI/CI 復合源提高實驗效率

八種磺酸酯標準品MRM色譜圖

方法原理：藥品溶于乙酸乙酯，，有機濾膜過濾后使用三重四極桿氣質檢測。

方法特點：可以同時檢測不同類的磺酸烷基酯，三重四極桿氣相色譜質譜抗干擾能力強可用于復雜基質樣品的檢測

 島津解決方案之N-亞硝胺篇 

N-亞硝胺

N-亞硝胺類化合物是一類強致癌有機化合物，它由前體物質硝酸鹽、亞硝酸鹽和胺類通過化學或生物學途徑合成。典型代表化合物有N，N-二甲基亞硝胺（NDMA）、N，N-二乙基亞硝胺（NDEA）。2018年被爆出沙坦類藥物中含有遺傳毒性雜質NDMA，尤其是纈沙坦和氯沙坦尤為嚴重。

N-亞硝胺化合物結構

方案1  液相色譜

高130Mpa的高耐壓，完美應對各種分析

•高通量自動進樣器，實現樣品的連續(xù)分析

•可配備流動相精靈，診斷精靈以及修復精靈

•新設計的三維中文色譜軟件，符合GMP標準

NDMA和NDEA 均在10min以內出峰，分離度良好，5 ng/mL標準品溶液靈敏度輕松滿足ANSM French OMSL法規(guī)要求。

方案2  三重四極桿氣相色譜質譜

下圖為6種N-亞硝胺定量限MRM圖，峰型完美。應對歐洲藥典質量控制要求so easy。

方案3  液相色譜質譜

•UF-Swiching技術:真正意義上實現了正、負離子同時采集；

•UF-Scaning技術:掃描速度可達30000u/sec；

•UF- Sweeper Ⅲ技術：離子碰撞過程的超低串擾；

•UF- Senstivity技術：三重脫溶劑系統(tǒng)，實現超高靈敏度;

輕松再現FDA和EDQM法規(guī)中規(guī)定的NDMA和NDEA檢測方法，并使用LabSolutions軟件實現了內標法和外標法同時定量。

5.0 ng/mL標準樣品MRM色譜圖

島津自1875年創(chuàng)業(yè)以來，始終秉承創(chuàng)始人島津源藏的創(chuàng)業(yè)宗旨“以科學技術向社會做貢獻”，不僅視自己為儀器供應商，而且努力向各個行業(yè)的用戶分享島津豐富的專業(yè)資源和強大的應用支持。為應對制藥行業(yè)相關用戶對遺傳毒性雜質的檢測需求，島津公司開發(fā)了基于LC、GCMS、HS-GCMS、GC-MS/MS以及LC-MS/MS等平臺的相關藥物中遺傳毒性雜質的檢測方法。島津分析中心也精心推出《沙坦類藥物中遺傳毒性雜質檢測方案》和《藥品中遺傳毒性雜質檢測整體解決方案》，希望我們的工作對您有所幫助。