酒精濫用標志物檢測,您了解嗎?
導讀
酒精濫用是眾多國家存在的社會問題之一。多年來,國內(nèi)外學者們都在致力尋找研究合適的生物學標記物,用以評估酒精濫用情況,其中乙基葡萄糖醛酸苷(ethyl glucuronide, EtG)就是近年來被廣泛關(guān)注的一種重要的酒精濫用判斷指標。EtG含量與乙醇攝入量的相互關(guān)系,利用EtG作為乙醇攝入特征性指標推斷飲酒時間,利用EtG含量區(qū)分是否酗酒以及判斷尸體中乙醇來源等具有重要意義。
在乙醇可直接檢測的情況下,為什么還要檢測EtG?
在酒后肇事逃逸后或酒后駕車鑒定中,由于乙醇在體內(nèi)代謝較快,一般飲酒后6-8h體內(nèi)已檢測不到乙醇,特別是在酒后駕車肇事逃逸案件中,抽血與事故發(fā)生時間間隔過長,血液中已檢不出乙醇成分,但可以檢測到EtG,它是乙醇在人體內(nèi)代謝的標志性產(chǎn)物,由乙醇與尿嘧啶核苷-5’-二磷-葡萄糖醛酸結(jié)合生成。
乙基葡萄糖醛酸苷結(jié)構(gòu)式
EtG檢測標準
2019年12月1日開始實施的公共安全行業(yè)標準GA/T 1633-2019 《法庭科學血液、尿液中乙基葡萄糖醛酸苷檢驗氣相色譜-質(zhì)譜和液相色譜-質(zhì)譜法》中規(guī)定了法庭科學血液、尿液中乙基葡萄糖醛酸苷(EtG)的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)和氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(GC-MS/MS)定性定量檢驗方法。
島津應對之道
方案一:LCMS-8045檢測血液和尿液中的EtG含量
參考標準:GA/T 1633-2019 《法庭科學血液、尿液中乙基葡萄糖醛酸苷檢驗液相色譜-質(zhì)譜法》
血液和尿液以沉淀蛋白法處理后,上機檢測。
島津LCMS-8045三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀
該方法靈敏度好(加標濃度為LOQ的血液和尿液樣品所得MRM色譜圖中,EtG色譜峰S/N均遠大于10),分析速度快(單次進樣分析時間僅需6 min),重復性好(不同濃度的基質(zhì)加標樣品分別連續(xù)分析6次,保留時間和峰面積RSD分別不高于0.30%和5.86%),適合血液和尿液中EtG的定量分析。
圖 1. 空白尿液(左)和空白血液(右)加標 LOQ 濃度樣品 MRM 色譜圖
方案二:GCMS-TQ8050 NX檢測尿液中的EtG含量
參考標準:GA/T 1633-2019 《法庭科學血液、尿液中乙基葡萄糖醛酸苷檢驗氣相色譜-質(zhì)譜法》
島津GCMS-TQ8050 NX三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀
尿液以乙腈沉淀蛋白,離心,取上清液采用衍生劑衍生化后進樣分析。結(jié)果表明,在50~1000 ng/mL的濃度范圍內(nèi),EtG的線性相關(guān)系數(shù)R為0.9992,線性關(guān)系良好。
圖2. EtG的質(zhì)量色譜圖(200 ng/mL)
圖3. EtG陽性樣品
EtG是乙醇體內(nèi)代謝的高靈敏、特異性生物指標,乙醇在體內(nèi)消除后,6-18h內(nèi)仍可在血液和尿液中檢測到EtG。如上圖所示,某血液樣本中檢測出EtG成分,可證明該血液樣本對象近期確實發(fā)生了飲酒行為。通過對血液和尿液中EtG的檢測和分析,可以回溯關(guān)注對象相當長時間內(nèi)的乙醇攝入量和攝取時間,以及判定事發(fā)時當事人是否為酒后行為具有重要意義。
小結(jié)
EtG是乙醇體內(nèi)代謝的高靈敏、特異性生物指標。血液和尿液中EtG的檢測和分析,在解決乙醇攝取量和攝取時間,以及判定事發(fā)時當事人是否為酒后行為具有重要意義。使用島津LCMS-8045和GCMS-TQ8050 NX檢測血液和尿液中的EtG,靈敏度高,分析速度快,重復性好,可以很好滿足公安司法檢測行業(yè)的相關(guān)需求。
春節(jié)臨近,小編在此提醒,做好疫情防控的同時,時刻牢記“喝酒不開車,開車不喝酒”,酒后駕駛危險多。為了您和他人的安全,為了過個平安喜慶的春節(jié),切勿酒后駕駛!