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BSW-2P-PCR基因擴增實驗原理、操作步驟 - PCR基礎(chǔ)知識
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更新時間:2024-12-15 21:00:07

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PCR儀實際就是一個溫控設(shè)備,能在95℃,55℃,72℃之間很好地進行溫度控制。
根據(jù)DNA擴增的目的和檢測的標(biāo)準(zhǔn)可以將PCR儀分為:普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR,實時熒光定量PCR儀等幾類

PCR原理可以看出,PCR儀的關(guān)鍵是升降溫的步驟。
      對普通PCR儀來說,溫度控制指標(biāo)主要是指溫度的準(zhǔn)確性、均勻性、以及升降溫速度,對梯度PCR儀來說,除了溫度的準(zhǔn)確性和均勻性、升降溫速度以外,還必須考慮儀器在梯度模式和標(biāo)準(zhǔn)模式下是否具有同樣的溫度特性。
      溫度的準(zhǔn)確性是指樣品孔溫度與設(shè)定溫度的*性,它直接關(guān)系到實驗的成敗。如果排除樣品加入過程中的問題,對于PCR反應(yīng)而言zui重要的莫過于溫度控制的準(zhǔn)確性,由于PCR是一個幾何級數(shù)擴增的過程,擴增過程中退火溫度的細微變化會被放大而直接影響結(jié)果,不論是變性、退火還是延伸都需要準(zhǔn)確控制溫度,對退火溫度而言溫控顯的尤為重要,有時1度甚至0.5度的差異也能決定實驗的成功與失敗,所謂差之毫厘,謬之千里。因而對PCR擴增儀而言溫度控制就意味著質(zhì)量。

溫度控制除了精確度,還有一個廠家喜歡大力宣傳的指標(biāo)——升降溫的速度。更快的升降溫速度,可以縮短反應(yīng)進行的時間,而且縮短了可能的非特異性結(jié)合、反應(yīng)的時間,能提高PCR反應(yīng)煌特異性。因此從本質(zhì)而言溫控方式就從以前相對穩(wěn)定耐用的機械式轉(zhuǎn)向了升降溫更快速的半導(dǎo)體。除了機械本身的原因,影響升降溫速度的還有制作承托樣品管的基座模塊的材料的導(dǎo)熱性。
      作為用戶來說,當(dāng)然更愿意選擇升降溫速度快的,這就像汽車上好看的表面配置一樣容易看到,而內(nèi)在的穩(wěn)定性和耐用性往往是看不到的而容易被忽略。必須注意到,儀器的升降溫速度和樣品管中的樣品的升降溫速度并非同一回事,因為樣品管與基座接觸的緊密性、導(dǎo)熱性、鄰近樣品管的相互影響都會影響樣品的實際升降溫速度。

所以上海啟步生物科技有限公司針對這個問題特別增加了溫度補償功能,促使著PCR工作中達到zui穩(wěn)定的溫度效果。

   

文章來源來:啟步生物

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