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建立樣品準備區(qū)
這個區(qū)域?qū)iT用作樣品的準備,在制備和操作用于核酸提取的試劑時應(yīng)該采取預(yù)防措施 ⑴PCR產(chǎn)物和帶有要擴增序列的DNA克隆不能在這個房間操作。
⑵組織培養(yǎng)物、組織標本和血清樣品都帶進樣品準備間處理,以根據(jù)應(yīng)用的需要提取DNA或RNA。
⑶用于樣品處理的工具不能被用作普通分子克隆的工具,也不能用作操作靶序列。 ⑷DNA樣品應(yīng)該用有專門的防護或正壓活塞式移液管操作,以防止在吸取樣品時有氣溶膠遺留。
⑸大體積樣品應(yīng)該用單獨包裝的無菌一次性移液管吸取。
⑹管子打開前都要簡短離心以減少氣溶膠的產(chǎn)生,而且管子不能用力崩開,這樣會產(chǎn)生氣溶膠。
⑺任何時候都應(yīng)該穿實驗服和帶手套,手套要經(jīng)常更換,尤其在抽提過程中每一步之間都要更換。實驗服要專門用于樣品準備間,經(jīng)常清洗。
樣品準備和RNA-PCR RNA-PCR的額外步驟需要額外的樣品操作,這樣增加了樣品之間污染的機會。青海PCR實驗室裝修工程為了避免這一問題,反轉(zhuǎn)錄一步可以在樣品準備區(qū)進行。在RNA-PCR中應(yīng)用UNG以防止污染的方法也有報道。
建立前PCR區(qū)。
該去專門用于準備各種反應(yīng),這個區(qū)域必須保持干凈,而且沒有來自克隆和樣品準備的污染。前PCR區(qū)必須要有試劑和準備,特別是專門用于前PCR區(qū)的正壓活塞式移液管。
控制污染的方法。
青海PCR實驗室裝修工程已設(shè)計出很有力的酶學(xué)方法用來消除一種形式的污染—使用UNG,這一技術(shù)能有效地消除由PCR產(chǎn)物引起的污染。另一種控制污染的方法是使用紫外線,這種方法不能*消除污染問題,但可以將污染降低幾個數(shù)量級。
后PCR區(qū)PCR完成以后,需要分析樣品并解釋數(shù)據(jù),應(yīng)該留出一個專門用于反應(yīng)后處理樣品的地方。后PCR活動中使用的所用試劑、一次性耗材和儀器都必須是專門用于這一目的,決不能把實驗室這一區(qū)域的試劑或儀器用于任何前PCR活動 用zui健康的材質(zhì)、zui用心的設(shè)計、zui*的工藝,為您打造一個“凈”的空間
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