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色譜耗材有這些,你都清楚嗎?
閱讀：4232 發(fā)布時(shí)間：2020-4-26
1.氣相色譜中的幾個(gè)概念：
氣相色譜：
以氣體為流動(dòng)相，依據(jù)組分與固定相之間分配吸附等作用力的差異而實(shí)現(xiàn)復(fù)雜樣品分離的一種分離技術(shù)。分離對(duì)象是可揮發(fā)、且熱穩(wěn)定，沸點(diǎn)一般不超過(guò)500度的樣品。
氣體：
載氣——用于傳送樣品通過(guò)整個(gè)系統(tǒng)的氣體。
檢測(cè)器氣體——某些檢測(cè)器所需的支持氣體，如，F(xiàn)ID。
樣品引入：
將樣品蒸汽引入載氣的過(guò)程。該過(guò)程應(yīng)對(duì)樣品蒸汽有小影響。
色譜柱：
實(shí)現(xiàn)樣品組分的分離。
檢測(cè)器：
對(duì)流出柱的樣品組分進(jìn)行識(shí)別和響應(yīng)。
數(shù)據(jù)采集：
將檢測(cè)器的信號(hào)轉(zhuǎn)換為色譜圖，以備手動(dòng)或自動(dòng)定性、定量分析之用。
2.氣路中為什么要用氣體捕集阱；GC中常用有哪幾類(lèi)捕集阱？
GC載氣中的常見(jiàn)的污染物有水分，氧氣，烴類(lèi)化合物和鹵代烴，其對(duì)色譜柱的壽命及被分析物的檢測(cè)有很大影響，不良的影響包括：
水分：
是色譜柱固定相降解的常見(jiàn)原因；可以損壞儀器；
氧氣：
常見(jiàn)的污染物；是色譜柱固定相降解和進(jìn)樣口襯管性能下降的常見(jiàn)原因；可引起不穩(wěn)定被分析物的分解；
烴類(lèi)化合物和鹵代烴：
通過(guò)增加檢測(cè)器背景噪音而降低檢測(cè)器靈敏度；還可引起基線漂移或波動(dòng)、污染物色譜峰、噪音或高的基線補(bǔ)償。
水分，氧氣，烴類(lèi)捕集阱是GC中常用的捕集阱。
3.不同的檢測(cè)器應(yīng)該分別配什么樣的捕集阱？
FID、NPD、FPD-空氣，尾吹氣，氫氣→烴類(lèi)捕集阱(如，5060-9096)
FID、NPD、FPD、TCD-載氣→水分、氧氣捕集阱(如，OT3-2)
ECD-尾吹氣→水分和氧氣捕集阱(如，OT3-2)
TCD-參比氣→烴類(lèi)捕集阱(如，5060-9096)
MSD-氦氣，甲烷→除水分、氧氣、烴類(lèi)的組合捕集阱(如，RMSH-2)和氧氣指示捕集阱(如，IOT-2-HP)
以上捕集阱建議6～12個(gè)月?lián)Q一次，具體看顧客的使用頻率。
4.在GC的進(jìn)樣口端涉及的消耗品有哪些？
注射器、進(jìn)樣墊、O型圈5188-5365、襯管、平流平板(鍍金密封墊)、金屬墊片5061-5869、石墨密封墊、柱螺母。
5.為什么要更換進(jìn)樣隔墊？隔墊有哪些類(lèi)型？如何根據(jù)客戶需求選擇進(jìn)樣隔墊？
隔墊需定期更換，可防止：漏氣、分解、樣品損失、柱流量或分流流量下降、出鬼峰、柱效下降。不同的隔墊有不同的性能：
流失性與溫度優(yōu)化隔墊(BOT)：5183-4757
溫度范圍寬，低流失→適合于質(zhì)譜，進(jìn)樣口高溫度400度，減少在進(jìn)樣口處的沾粘。
長(zhǎng)壽命隔墊5183-4761
預(yù)穿孔，延長(zhǎng)使用壽命，減少成核；自動(dòng)進(jìn)樣優(yōu)選隔墊，適合通宵運(yùn)行；進(jìn)樣達(dá)400次及350度高溫。
高級(jí)綠色隔墊5183-4759
壽命長(zhǎng)，耐高溫；進(jìn)樣次數(shù)多；降低進(jìn)樣口的粘貼；溫度達(dá)350度。
以上三種隔墊屬高級(jí)隔墊，經(jīng)等離子體處理，不沾粘隔墊
通用型隔墊：
溫度350度，次數(shù)達(dá)200次，經(jīng)濟(jì)節(jié)約型；
6.如何選擇石墨墊與柱螺母？
首先了解石墨墊的兩種材質(zhì)：
石墨→材質(zhì)軟，溫度上限高。
vespel→由耐高溫的聚酰亞胺制成，材質(zhì)硬，高溫產(chǎn)生流失。
石墨墊與柱螺母：
短墊配短帽，長(zhǎng)墊配長(zhǎng)帽(如，MS接口柱螺帽05988-20066應(yīng)配預(yù)老化的85%vespel，15%石墨墊長(zhǎng)墊，通用柱螺帽可配85%vespel，15%石墨墊短墊)
石墨墊的選擇，更換頻率一般更換色譜柱、泄漏時(shí)就進(jìn)行更換。
7.襯管的作用是什么，什么時(shí)候更換襯管？選擇襯管時(shí)應(yīng)考慮什么因素？
襯管是進(jìn)樣體系的中心元件，樣品在此蒸發(fā)而成氣體。定期更換襯管主要取決于以下情況：對(duì)比以前做的譜圖；樣品的潔凈程度；色譜峰是否出現(xiàn)異?，F(xiàn)象：出現(xiàn)鬼峰、峰形變化、重現(xiàn)性差、樣品高溫分解等。
選擇襯管應(yīng)考慮的因素：進(jìn)樣口類(lèi)型/進(jìn)樣技術(shù)、襯管體積、襯管處理或去活、特殊性能(石英棉、石英杯、細(xì)徑錐等)
8.為什么要使用去活化的襯管及玻璃棉？什么物質(zhì)使用去活不帶玻璃棉的襯管？
進(jìn)樣口襯管上的活性點(diǎn)可以吸附樣品組分，引起色譜峰拖尾，損失靈敏度和重現(xiàn)性。
當(dāng)不分流進(jìn)樣及分析稍有極性的化合物時(shí)，應(yīng)建議用去活化的襯管。
使用玻璃棉：
A.減少熱歧視，為樣品*揮發(fā)提供足夠的表面積
B.捕獲非揮發(fā)組分和隔墊碎屑，使其不至于進(jìn)入色譜柱
C.擦凈自注射器針頭上的樣品，從而提高了重現(xiàn)性，避免樣品在隔墊上的殘留。
使用去活不帶玻璃棉襯管的化合物有：酚類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)、農(nóng)藥類(lèi)、胺類(lèi)、濫用藥物、反應(yīng)性極性化合物、熱不穩(wěn)定化合物。
不分流進(jìn)樣模式：痕量分析、樣品濃度低、流速低、進(jìn)樣量小。
分流進(jìn)樣模式：樣品濃度高、流速大、進(jìn)樣量大。
9.fu代烴O型圈及石墨O型圈
fu代烴O型圈：不易變形，易更換，多數(shù)情況下使用
石墨O型圈：易變形及剝落，進(jìn)樣口溫度高于350度時(shí)使用。
更換頻率：二者一般在更換襯管的時(shí)候也同時(shí)更換O型圈
10.如何清洗分流平板(鍍金密封墊)
A.在溶劑中超聲清洗，烘干；
B.用非lu硅烷化試劑去活化：HMDS(六甲基二硅烷)或BSTFA(N，O雙(*基硅烷基)fu乙酰胺)或BSA(N,O-雙(*基硅烷基)乙酰胺)或TSIM、TSIM(N-*基硅烷咪唑)
C.用溶劑清洗，先惰性洗滌——甲苯，再用醇類(lèi)清洗——甲醇，烘干。
11.NPD中白銣珠與黑銣珠有何區(qū)別?
12.NPD，ECD，TCD，F(xiàn)ID，F(xiàn)PD分別是什么檢測(cè)器，性能特點(diǎn)是什么？
13.色譜柱有哪些柱參數(shù)？如何根據(jù)這些參數(shù)為客戶選擇色譜柱？
色譜柱柱參數(shù)：固定相，柱長(zhǎng)，內(nèi)徑，膜厚。
固定相的選擇：相似相溶原理。
非/弱極性柱—常用！中等極性柱—適用于復(fù)雜/困難的分離；強(qiáng)極性柱—多用于特殊應(yīng)用。
柱長(zhǎng)：
10～15m通常十個(gè)組分以下簡(jiǎn)單樣品的快速分析
25～30m標(biāo)準(zhǔn)柱長(zhǎng)滿足絕大部分應(yīng)用
50m，60m，100m復(fù)雜樣品的分析
內(nèi)徑：
0.53mm大口徑可替代填充柱能承受較大體積進(jìn)樣，痕量分析
0.32mm寬徑，分流/不分流進(jìn)樣，能承受較大體積進(jìn)樣
0.25mm窄徑分流進(jìn)樣，GC/MS應(yīng)用，較高柱效
0.18mm微徑較快分離高柱效
0.10mm快速GC，快速分離對(duì)儀器要求高
膜厚：
0.10um薄膜，保留和柱容量低適用于高沸點(diǎn)化合物、組分密集樣品或熱敏化合物0.25~0.50um標(biāo)準(zhǔn)膜厚應(yīng)用廣
1.0~10.0um厚膜保留和柱容量高適用于低沸點(diǎn)揮發(fā)性化合物
厚膜有利于掩蔽活性位點(diǎn)但高溫下柱流失較多
14.色譜柱的溫度極限如60℃至240℃/260℃各表示什么？
60℃—溫度下限，低于該溫度使用柱效會(huì)降低，但不會(huì)損傷色譜柱
240℃—恒溫溫度上限，可在此溫度長(zhǎng)時(shí)間使用
260℃—程序升溫溫度上限，不可超過(guò)此溫度，且在此溫度使用不得超過(guò)10分鐘
15.了解有關(guān)液相色譜柱的幾個(gè)參數(shù)及安捷倫色譜柱的分類(lèi)和應(yīng)用范圍。
表面積——顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和，以m2/gram表示；
高表面積對(duì)于多組份樣品的分離具有較強(qiáng)的保留能力，柱容量和分離度；
表面積低的填料通常能迅速達(dá)到平衡狀態(tài)，對(duì)于梯度淋洗尤為重要
孔徑——顆粒的孔或腔的平均尺寸，范圍60-10,000Å
大孔的填料顆?？梢匝娱L(zhǎng)溶質(zhì)大分子在填料表面滯留的時(shí)間，達(dá)到充分分離，改善峰形；樣品MW≤4000,選擇80Å的孔徑，樣品MW>4000選擇300Å的孔徑
碳覆蓋率——對(duì)色譜分離的影響，與基體物質(zhì)相連的鍵合相的量。
高碳覆蓋率：提高分辨率，分析時(shí)間長(zhǎng)；低碳覆蓋率：縮短運(yùn)行時(shí)間
封端/封尾——對(duì)色譜分離的影響，使用較短烷烴鏈鍵合游離硅羥基(二次鍵合)
封端：減輕待測(cè)組份與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應(yīng)而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象
對(duì)于極性樣品，未封端與經(jīng)過(guò)封端處理的色譜柱在選擇性上有明顯差異
粒徑——1.8um3.5um→快速分離
5um→行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)
7um→制備柱
16.如何沖洗液相色譜柱？
對(duì)于反相色譜柱的沖洗：
用以下溶劑至少各25mL沖洗色譜柱(分析柱)
不含緩沖鹽的流動(dòng)相
100%甲醇
100%乙腈
75%乙腈+25%異丙醇
100%異丙醇
100%二lu甲烷
100%己烷
*若使用己烷或二lu甲烷沖洗色譜柱，則在重新使用反相流動(dòng)相以前，必須用異丙醇沖洗色譜柱?。。?br />
對(duì)于正相色譜柱的沖洗：
用以下溶劑至少各50mL沖洗色譜柱(分析柱)
50%甲醇+50%三lu甲烷
100%乙酸乙酯
17.如何對(duì)氣相色譜柱進(jìn)行老化？
安裝色譜柱后，首先用至少3倍于平常工作流速的載氣吹色譜柱,然后將載氣流速調(diào)整到正常流速，開(kāi)始從100度升溫迅速升溫到老化溫度，老化色譜柱。
老化溫度——在高于樣品分析終溫20度但不超過(guò)色譜柱的恒溫溫度上限的狀態(tài)下，恒溫2小時(shí)的方法快速老化一支新的毛細(xì)管色譜柱，色譜柱老化時(shí)的升溫速率沒(méi)有限制，即可使用高升溫速率老化色譜柱。
18.液相色譜儀有哪些重要組成部分？液相有哪些檢測(cè)器？
脫氣機(jī)、泵、柱溫箱、自動(dòng)進(jìn)樣器、檢測(cè)器。檢測(cè)器有：
VWD可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器、DAD二極管陣列檢測(cè)器、MWD多波長(zhǎng)檢測(cè)器、RID、示差折光檢測(cè)器、FLD熒光檢測(cè)器。
19.如何選擇溶劑入口過(guò)濾頭？
用于常規(guī)和毛細(xì)液相的溶劑過(guò)濾頭有：玻璃過(guò)濾頭20μm孔徑(5041-2168)，PTFE連接頭5mm/3.2mm(5062-8517)，不銹鋼過(guò)濾頭12-14μm孔徑(01018-60025)
用于制備液相的溶劑過(guò)濾頭有：玻璃過(guò)濾頭40μm孔徑(3150-0944)，PTFE連接頭7mm/4mm(G1361-23204)
若流動(dòng)相涉及以下溶劑，應(yīng)避免使用不銹鋼過(guò)濾頭：碘化鋰,lu化鉀，高濃度的硝酸及硫酸，在有機(jī)溶劑中的有機(jī)酸溶液，如甲醇中1%乙酸會(huì)腐蝕不銹鋼，四lu化碳和異丙醇或THF混合液等。
日常對(duì)玻璃濾芯的清洗可用35%的硝酸浸泡1小時(shí)(不用超聲波清洗，會(huì)引起破裂)
20.流通池的選擇指南
毛細(xì)管液相色譜柱(內(nèi)徑0.3或0.5mm)500nL流通池；
微徑或溶劑節(jié)省型液相色譜柱(內(nèi)徑1.0或2.1mm)半流通池；
傳統(tǒng)液相色譜柱(內(nèi)徑3.0或4.6mm)標(biāo)準(zhǔn)流通池反壓高于100bar，高壓流通池形；樣品MW≤4000，選擇80Å的孔徑，樣品MW>4000選擇300Å的孔徑；
碳覆蓋率——對(duì)色譜分離的影響，與基體物質(zhì)相連的鍵合相的量。
高碳覆蓋率：提高分辨率，分析時(shí)間長(zhǎng)；低碳覆蓋率：縮短運(yùn)行時(shí)間
對(duì)色譜分離的影響，使用較短烷烴鏈鍵合游離硅羥基(二次鍵合)
封端：減輕待測(cè)組份與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應(yīng)而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象
對(duì)于極性樣品，未封端與經(jīng)過(guò)封端處理的色譜柱在選擇性上有明顯差異
粒徑：1.8um3.5um→快速分離
5um→行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)
7um→制備柱