QIAGEN Plasmid Kits12123質粒純化
上海優(yōu)高玖全新推薦,
- 純化得到相當于連續(xù)2次CsCl梯度離心得到的DNA純度
- 高產(chǎn)量質粒DNA
- 經(jīng)濟的制備方法
- 使用LyseBlue,獲得的裂解效果和zui大的DNA產(chǎn)量
QIAGEN Plasmid Kits應用重力流陰離子交換柱純化轉染級質粒DNA。該試劑盒可純化獲得至多10 mg的質粒DNA。離心獲得澄清的裂解產(chǎn)物和異丙醇沉淀。
轉染效率與質粒純化方法。
采用不同方法制備pRSVcat DNA,通過脂質體介導的轉染將其導入的細胞系內,40小時后測定CAT表達水平,確定轉染效率。每個柱形代表4個獨立的轉錄的平均值(2個質粒制備物分別轉染2次)。使用QIAGEN Plasmid Kit可獲得zui高的轉染效率。
QIAGEN Plasmid Kit實驗流程。
將中性細菌裂解物直接置于QIAfilter Cartridge內孵育,數(shù)秒內即可過濾澄清。然后將澄清的裂解物上樣至陰離子交換純化柱,在適當?shù)牡望}和pH條件下,質粒DNA會選擇性地結合上去。利用中鹽濃度的洗滌液去除RNA、蛋白質、代謝物及其他低分子量雜質,使用高鹽緩沖液洗脫超純的質粒DNA。利用異丙醇沉淀對DNA進行濃縮并脫鹽,并通過離心收集。