BirA酶（生物素連接酶)

規(guī)格：       50ml

來(lái)源：       E. coli.

儲(chǔ)存緩沖液： 50 mM Tris(pH 8.0), 150 mM NaCl, 20% Glycerine, 1 mM DTT.

儲(chǔ)存條件：   于干冰中運(yùn)送，到達(dá)后要立刻置于-80°C中。解凍后分裝，近期使用可保存于4°C，長(zhǎng)時(shí)間的使用需保存于在-80°C.

濃度:        5 mg/mL

酶活性:      5000 Units/µg

生物素蛋白連接酶；

            生物素蛋白連接酶活化生物素形成生物酰5’ 腺苷酸，再將生物素轉(zhuǎn)移到生物素受體蛋白上。它是生物素的操縱子的抑制物，由birA基因編碼.

Mol wt       35000

試劑盒組成 ：

BiomixA（0.5M bicine。pH 8.3）:1ml, 凍存-20℃

BiomixB(100mM ATP, 100mM MgOAc, 200mM biotin): 1ml, 凍存-20℃

BirA enzyme(3mg/ml):50ul，凍存-20℃

d-biotin(500 mM biotin):1ml，凍存-20℃

實(shí)驗(yàn)步驟

以700 µl純化好的 MHC/peptide 復(fù)合物（1-2mg）為例：加入：

100 µl BiomixA，100 µl BiomixB，100 µl d-biotin，10 µl BirA enzyme (30 µg)，0.5 ul pepstatin (2 mg/ml in DMSO)，0.5 µl leupeptin (2 mg/ml in dH₂O)

室溫孵育一天（反應(yīng)液中不要有EDTA）