實(shí)用科普丨GC故障排除-最先洗脫化合物峰是分叉峰或?qū)挿?/h1>

閱讀：67發(fā)布時(shí)間：2025-1-6

色譜圖就像指紋。

如果你能很好地“讀懂"色譜圖，

你通常就可以找到問(wèn)題的原因所在，

采取針對(duì)性的解決方案。

圖1 由于進(jìn)樣錯(cuò)誤導(dǎo)致?lián)]發(fā)性化合物的峰形變寬

有時(shí)色譜圖看起來(lái)像圖1這樣。這是對(duì)氮?dú)庵泻驓怏w的分析。濃度非常低，并且使用定量環(huán)直接進(jìn)樣到柱上。最先洗脫組分顯示出顯著的譜帶展寬。如果我們以這些峰來(lái)計(jì)算理論塔板數(shù)，則會(huì)顯示極低的數(shù)值。

此處的問(wèn)題在于，大的進(jìn)樣體積導(dǎo)致了這樣的峰展寬。這對(duì)最易揮發(fā)的組分的影響尤其大。這些組分已經(jīng)在柱中“移動(dòng)"，而進(jìn)樣仍在進(jìn)行。

如果柱流量為4 mL/min（30 cm/s），且進(jìn)樣體積為400 uL，則需要6秒才能將所有樣品轉(zhuǎn)移到柱中。非保留組分的初始帶寬已經(jīng)是6秒，從空間來(lái)說(shuō)也就是180厘米峰帶寬。如果組分具有保留，則會(huì)產(chǎn)生聚焦效果，具體取決于組分保留的程度。

理想情況下，樣品中的組分必須聚焦在色譜柱入口處的窄帶上。如圖2所示，使用了更高的分流比，差別很明顯，H2S和COS的峰形立即得到了改善。

圖2 使用足夠高的分流比，保持小的進(jìn)樣帶，柱效不受影響

使用保留盡可能高的GC柱：保留越高，相聚焦效應(yīng)越大，進(jìn)樣帶越窄。這也就是為什么在圖1和圖2中都使用了7微米膜厚的色譜柱。同樣的問(wèn)題也會(huì)發(fā)生在頂空分析中。也就是說(shuō)，這些組分需要被固定相捕集。這就是為什么對(duì)于頂空分析，通常使用厚膜柱（如Rtx-VMS和Rxi-624Sil-MS）。

使用可承受最高進(jìn)樣量的GC柱。這將是0.53mm內(nèi)徑的。0.53mm內(nèi)徑的色譜柱可以處理最大的進(jìn)樣體積，使用0.53mm內(nèi)徑的色譜柱，進(jìn)樣帶長(zhǎng)將是最短的。

從盡可能低的柱溫箱溫度開始。如果沒(méi)有柱溫冷卻系統(tǒng)，對(duì)于大多數(shù)GC來(lái)說(shuō)，大約是30℃。

進(jìn)可達(dá)到所需的檢測(cè)限的盡可能少的樣品量。使用分流系統(tǒng)可以很容易地做到這一點(diǎn)；0.53mm柱通常需要最小為1:5的分流比。

死體積總是會(huì)導(dǎo)致峰拖尾，這將影響緊密洗脫組分的分離。如果是直接進(jìn)樣，請(qǐng)考慮使用Uniliner襯管。如果直接連接到進(jìn)樣閥上，請(qǐng)確保使用正確的卡套。

圖3 甲烷峰因進(jìn)樣錯(cuò)誤而分叉

圖3顯示了另一個(gè)出現(xiàn)進(jìn)樣錯(cuò)誤的例子。這里進(jìn)的是氣體樣品，盡管使用了小的樣品體積和大的分流，但還是發(fā)現(xiàn)第一個(gè)洗脫峰（甲烷）分叉。

在這種情況下，存在由雙重進(jìn)樣引起的進(jìn)樣問(wèn)題。

當(dāng)使用氣體進(jìn)樣針進(jìn)樣時(shí)，揮發(fā)性組分可能會(huì)發(fā)生這種情況。為了避免這種情況，可以使用快速的自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣或使用定量環(huán)的閥進(jìn)樣。