吸光度原理

l 吸光度：當(dāng)入射光頻率與物質(zhì)分子的震動(dòng)頻率一致，或者入射光引起物質(zhì)分子電子能級(jí)躍遷，都會(huì)產(chǎn)生光學(xué)吸收現(xiàn)象。溶液的濃度越高，穿過溶液的分子也會(huì)相應(yīng)地被吸收越多。

l 其他：入射光透過物質(zhì)沒有發(fā)生任何反應(yīng)或者變化，直接透過的光即為透射光。彈性散射的發(fā)生會(huì)引起光改變方向，但是不會(huì)引起波長或者能量的變化，反之則為非彈性散射。

吸光度與透過率關(guān)系

l 測試樣品的透過率

l 透過率為透過光強(qiáng)度與原始光強(qiáng)的比值

如何根據(jù)您的應(yīng)用選擇不同的采樣附件是至關(guān)重要的。這其中就包括您需要考慮您的樣品是液體的還是氣體的；樣品的光學(xué)密度如何；是要原位測試，還是過程控制，或者是在一個(gè)反應(yīng)腔室內(nèi)。從應(yīng)用出發(fā)進(jìn)行附件篩選，海洋光學(xué)為您提供眾多附件選擇，從簡單的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用（比如比色皿和比色皿支架）到復(fù)雜的采樣工具（比如透射探頭和流動(dòng)注射裝置等等）。

如何確定未知樣品的濃度

l Lambert-Beer定律是一個(gè)線性方程

l 使用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液測試其吸光度值

l 吸光度值和濃度之間可以建立一條線性關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線

l 最后通過測量未知樣品的吸光度值，從線性關(guān)系曲線中讀取該樣品的濃度值

吸光度測量

基于吸光度的簡單實(shí)現(xiàn)與易使用，吸光度被廣泛運(yùn)用于液體和氣體的光譜測量技術(shù)中。吸光度光譜可以對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量鑒別或者對(duì)物質(zhì)進(jìn)行指紋認(rèn)證，亦或可以對(duì)溶液中的分子進(jìn)行濃度定量分析。

吸光度測量可以以多種形式呈現(xiàn)。或針對(duì)液體或?qū)怏w，而且還可以將該應(yīng)用集成到工業(yè)應(yīng)用環(huán)境和客戶所關(guān)注的測試中。樣品不再僅僅使用比色皿作為載體，流動(dòng)池、浸入式探頭、微量進(jìn)樣器、氣體存儲(chǔ)皿、微量比色皿等等都可以作為采樣裝置。

使用模塊化光譜儀，我們可以針對(duì)特定的吸光度測量來選擇不同波長范圍和分辨率的光譜儀，而且還能在實(shí)驗(yàn)室或者現(xiàn)場對(duì)整套光學(xué)測量裝置進(jìn)行快速、方便地更改。事實(shí)上，基于海洋光學(xué)強(qiáng)大的光譜儀、光源和采樣附件的產(chǎn)品線和靈活易用的搭配，可以針對(duì)不同的吸光度試驗(yàn)搭配出N中選擇。

吸光度測量的附件選擇

如何為您的吸光度測量選擇合適的采樣附件？以下提供一些參考：

測量使用環(huán)境與地點(diǎn)？更精確地說，什么樣的附件能滿足您的現(xiàn)場和實(shí)驗(yàn)室，并且方便易用？如果測試樣品能很簡單地使用比色皿或者試管進(jìn)行測量，那選擇就可以擴(kuò)展到比色皿支架（圖1）或者其他支架類產(chǎn)品。如果需要進(jìn)行實(shí)時(shí)的原位測量，或者流動(dòng)液體的測量，可以選擇透射形浸入式探頭（不同光程可選）（圖2）或者流動(dòng)池（圖3）等等。

l 樣品的性狀：液體還是氣體？由于氣體的特性，我們要么選擇高濃度樣品，要么選擇長光程容器進(jìn)行測量。根據(jù)不同的樣品，10cm光程的容器一般都足夠了，比如CUV-UV-10（圖4），或者使用準(zhǔn)直透鏡直接接觸到樣品中進(jìn)行測試。

l 測試樣品的光學(xué)密度如何？光學(xué)密度OD值直接影響您對(duì)測試樣品不同光程容器的選擇。光學(xué)密度越高，所需要的光程就越短。比如，SpecVette™作為高濃度樣品的理想配件，它的光程可以短至250µm，另外還有1cm和10cm的標(biāo)準(zhǔn)配件可選。另外一方面，低OD的樣品需要長光程配件，比如可以擴(kuò)展到500cm的長光程流通池（圖3）就是比較好的選擇。如果您需要了解更多樣品濃度與光程之間的關(guān)系信息，請(qǐng)參考比爾-朗博定律的具體介紹。

l 樣品的體積如何？測量樣品的體積也影響采樣附件的選擇。針對(duì)低于2uL的微量樣品，可以選擇微量比色皿（圖5）和微量取樣器（圖6）

針對(duì)連續(xù)流動(dòng)的樣品怎么選擇？形流動(dòng)注射裝置（圖7），毛細(xì)管電泳池（圖8），還包括那些可以使用泵裝置/塑料套管連接的裝置（圖9）都是流動(dòng)樣品測量吸光度的選擇。 

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