植入前基因篩查和診斷（PGS，PGD）指體外受精（IVF）過程中所做的胚胎或卵母細(xì)胞測試，以便選擇沒有染色體變異或帶有家族遺傳疾病等位基因的胚胎，提高懷孕成功率，降低特定遺傳病的傳遞風(fēng)險。微陣列分析是IVF機構(gòu)zui常用的PGS技術(shù)，應(yīng)用PicoPLEX技術(shù)的好幾種試劑盒被廣泛使用。包括Illumina’s 24Sure 微陣列（原 BlueGnome’s 24Sure）, Perkin Elmer’s KaryoLite BoBs developed for PGS和 Oxford Gene Technology’s CytoSure™ 微陣列。不過實驗室研究趨向是使用低深度的新一代測序（NGS）替代微陣列，PicoPLEX DNA-seq正好滿足這種需求。

植入前基因篩查診斷流程

首先從受精卵吸取一個極體或者從受精后第三天的5到10個胚胎細(xì)胞吸取單細(xì)胞。裂解細(xì)胞后，釋放出來的DNA進(jìn)行擴增，所得產(chǎn)物標(biāo)記后與含有目標(biāo)基因組的微陣列雜交。分析軟件會識別出拷貝數(shù)變異。具有高穩(wěn)定性和可再現(xiàn)性，PicoPLEX全基因組擴增技術(shù)已經(jīng)成為PGS的標(biāo)準(zhǔn)擴增技術(shù)。這一技術(shù)也適用任何單細(xì)胞樣品和皮克級純化DNA的基因特征分析。

胚胎細(xì)胞（極體卵裂囊胚）——PicoPLEX試劑（裂解擴增DNA）——微陣列雜交——染色體變異分析

PicoPLEX技術(shù)

PicoPLEX使用非互補引物進(jìn)行隨機引物延伸，所得文庫系統(tǒng)偏差高，而隨機偏差極低。

引物特點：隨機引物延伸和非互補引物

文庫特征：高系統(tǒng)偏差低隨機偏差

* US patent 7,803,550 and EP1924704

PicoPLEX® WGA Kit

植入前基因篩查（PGS）PicoPLEX®單細(xì)胞擴增試劑盒

從單細(xì)胞中擴增DNA構(gòu)建高重復(fù)性的文庫現(xiàn)在成為可能。PicoPLEX WGA kit采用技術(shù)，設(shè)計、優(yōu)化用于從單細(xì)胞中擴增單拷貝基因組DNA。起始量低至單細(xì)胞或6pg基因組DNA。便捷的單管操作流程減少失誤，節(jié)省時間并降低反應(yīng)背景。

PicoPLEX WGA Kit兼容微陣列比較基因組雜交（array CGH）分析及PCR平臺，被試管嬰兒行業(yè)供應(yīng)商如BlueGnome信賴并用于PGS/PGD。

操作流程

單管，三步。在1個PCR管或微孔中3個小時即可完成。無需樣品純化和轉(zhuǎn)移過程，降低了樣品損失，避免了操作污染和操作誤差。

單細(xì)胞擴增再現(xiàn)性良好

腫瘤細(xì)胞經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)分選后，采用PicoPLEX WGA Kit 擴增。每個細(xì)胞（藍(lán)色曲線）擴增比率相同，并且預(yù)期產(chǎn)量相同。不含細(xì)胞的樣品（綠色曲線；空白模板對照）顯示非常低的背景。

適用CNV分析

CNV（拷貝數(shù)變異）分析：單個卵裂球樣品采用PicoPLEX WGA Kit擴増，標(biāo)記后與BlueGnome®24sure® arrays雜交（Genesis Genetics Institute），結(jié)果清晰地顯示了拷貝數(shù)變異。2011年ESHRE （歐洲人類生殖與胚胎學(xué)會）的臨床實驗證明了采用PicoPLEX 技術(shù)進(jìn)行人類染色體核型分析的準(zhǔn)確性。

PicoPLEX技術(shù)

技術(shù)優(yōu)勢：利用特殊隨機引物（Quasi-random primer）引發(fā)線性擴增進(jìn)行全基因組擴增。

相比于以往的PCR、MDA、MALBC為基礎(chǔ)的單細(xì)胞全基因組擴增技術(shù)，操作簡單快速。擴增zui大優(yōu)勢：再現(xiàn)性良好。

PicoPLEX技術(shù)：單細(xì)胞在單管或單孔中裂解。在預(yù)擴增過程中，特殊隨機引物與基因組DNA結(jié)合延伸，形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)文庫，在接下來的擴增中，只有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的文庫被擴增。

（中文版：單細(xì)胞細(xì)胞裂解模版DNA 變性與回收模版退火引物引物延伸變性與引物重連延伸；莖環(huán)形文庫收集擴增

*步：細(xì)胞裂解；第二步：預(yù)擴增采用特殊隨機引物選擇性結(jié)合基因組DNA后進(jìn)行擴增；第三步：擴增使用含有illumina index的引物進(jìn)行擴增）

應(yīng)用

拷貝數(shù)變異分析-CNV（aCGH）

單核苷酸多態(tài)性分型-SNP

基因突變篩查-PCR

不能直接應(yīng)用NGS，PicoPLEX DNA-seq Kit可以直接應(yīng)用NGS。

擴展產(chǎn)品

PicoPLEX DNA-Seq (Picoseq) 技術(shù)在PicoPLEX WGA技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展，擴增部分與PicoPLEX類似，但是在擴增的第二步，會加入Illumina接頭和index（條形碼）。

訂購信息

貨號	產(chǎn)品名稱	包裝
RB3050/R30050	PicoPLEX WGA Kit單細(xì)胞基因組擴增試劑盒，array CGH、PCR分析用	50次反應(yīng)
RB3381/R300381	PicoPLEX DNA-seq Kit，48種雙端Illumina indexes	48次反應(yīng)

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細(xì)胞治療

耗材

細(xì)胞凍存/細(xì)胞分離

細(xì)胞庫

干細(xì)胞（無血清）培養(yǎng)基

血清及替代物/細(xì)胞因子

抗體/蛋白質(zhì)

核酸分析/測序/蛋白組學(xué)

小型儀器設(shè)備

檢測試劑

其他

微球

生長因子/細(xì)胞因子

PCR試劑耗材

NGS測序試劑耗材

Picoplex：植入前基因篩查診斷單細(xì)胞文庫構(gòu)建技術(shù)

微陣列（arrays）分析是zui廣泛使用的PGS技術(shù)。