上海橋星貿(mào)易有限公司

主營產(chǎn)品： 進(jìn)口透析袋,密理博ECL發(fā)光液,B27無血清培養(yǎng)基,Gibco膠原酶

10

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公司信息

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86-021-65672052
手機(jī)：
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86-021-62097628
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上海市楊浦區(qū)寧國路229號13號樓704室
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200090
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SDS-PAGE蛋白電泳套裝現(xiàn)貨供應(yīng)
SDS-PAGE蛋白電泳套裝現(xiàn)貨供應(yīng)
參考價 ￥ 460
訂貨量 1
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號
  • 品牌
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 上海市

更新時間：2024-01-07 18:27:24瀏覽次數(shù)：1548

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息，謝謝!

【簡單介紹】
貨　　號：P0500
名　　稱：SDS-PAGE蛋白電泳套裝現(xiàn)貨供應(yīng)
規(guī)　　格：50T
價　　格：460.00
【詳細(xì)說明】

SDS-PAGE蛋白電泳套裝現(xiàn)貨供應(yīng)

 

名稱

規(guī)格

保存條件

5×蛋白上樣緩沖液（含DTT）

1ml

-20度

Tris-甘氨酸蛋白電泳緩沖液

一包（10L）

RT

30%丙烯酰胺(29:1)

100mlX2

2-8度

1.5mol/LTris(pH8.8)

100mlX2

RT

1.0mol/LTris(pH6.8)

60ml

RT

過硫酸銨干粉

2g

RT

10%SDS

10ml

RT

TEMED

1.5ml

RT

說明書

一份

一份

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

產(chǎn)品簡介

本公司提供的蛋白電泳套裝包含凝膠制備，蛋白上樣緩沖液及蛋白電泳上樣緩沖液。

本公司生產(chǎn)的SDS-PAGE蛋白電泳套裝是按照經(jīng)典方法配制而成。本套裝根據(jù)電泳體系的大小，可進(jìn)行約50次左右。

SDS-PAGE蛋白電泳套裝現(xiàn)貨供應(yīng)

使用說明：

一，前期工作：蛋白提取及定量。

二，蛋白上樣液的制備：蛋白上樣緩沖液解凍，輕輕混勻，按4體積蛋白樣品加入一體積的5×蛋白上樣緩沖液，混勻，沸水中水浴5分鐘。

三，電泳液的配制：將一包電泳液干粉全部倒入1L－2L的燒柄中，加一定量的水溶解成2L配成5×Tris-甘氨酸蛋白電泳緩沖液，用前再稀釋5倍或者先配成1L成為10×Tris-甘氨酸蛋白電泳緩沖液，用前再稀釋10倍。

四，取10-15支1.5ml離心管，將過硫酸銨干粉分裝成100mg/支，標(biāo)記好備用。

五，凝膠制備：

1，  取一支稱好的100mg過硫酸銨干粉，加入1ml蒸餾水，混勻，此配好的10%過硫酸銨溶液2－8度可保存一周，一周后請用新的。洗干凈電泳玻璃板，夾好。

2，  根據(jù)目標(biāo)蛋白分子量大小，選取凝膠濃度，按下表配制。先配分離膠，再配濃縮膠。

 

　

分離膠15%

分離膠12%

分離膠10%

分離膠8%

濃縮膠（5%）

總體積

10ml

10ml

10ml

10ml

5ml

30%丙烯酰胺(29:1)

5ml

4ml

3.3ml

2.7ml

0.83ml

1M Tris-HCL (PH6.8)

0

0

0

0

0.625ml

1.5M Tris-HCL(PH8.8)

2.5ml

2.5ml

2.5ml

2.5ml

0

10%SDS

100ul

100ul

100ul

100ul

50ul

ddH2O

2.3ml

3.3ml

4.0ml

4.6ml

3.42ml

10%過硫酸銨

100ul

100ul

100ul

100ul

75ul

TEMED

10ul

10ul

10ul

10ul

7.5ul

 

 

 

 

 

 

 

 

注意：

1，TEMED和10%過硫酸銨zui后加，在加入前需混勻前面所加試劑。10%過硫酸銨在4℃有效期為一周，TEMED易揮發(fā)，使用后請蓋緊瓶蓋。在常溫下膠30分鐘內(nèi)可以凝固，如溫度過低，可放37℃溫箱凝固。灌完分離膠后，輕輕的加1ml ddH2O封上層，膠凝固后可見到分界線。灌濃縮膠前，先傾去水層，再用吸紙吸干。濃縮膠灌好后立刻插入梳子。濃縮膠凝固后，放入電泳液中(讓電泳液漫過加樣孔)，輕輕的撥出梳子，可防加樣孔變形。

2，配制量可按上表等比加減。如果所用膠濃度與上面不同，可自行調(diào)整，主要是調(diào)整30%丙烯酰胺的量（需要濃度×總體積/30%），zui后用水補(bǔ)足總體積。

六，上樣，電泳，一般是濃縮膠80V，分離膠120V恒壓，等溴酚蘭電泳到合適的位置，結(jié)束電泳，染色或者進(jìn)行下一步實驗。

 附：SDS-PAGE分離膠的濃度與*分離范圍

SDS-PAGE分離膠濃度

*分離范圍

6%膠

57-212kD

8%膠

36-94kD

10%膠

20-80kD

12%膠

12-60kD

15%膠

10-43kD


配制6%的PAGE分離膠

成分

所需各成分的體積(毫升)

凝膠體積51015

20

25

30

蒸餾水

2.6

5.3

7.9

10.6

13.2

15.9

30%丙烯酰胺混合液

1.0

2.0

3.0

4.0

5

6.0

1.5mol/L Tris(pH8.8)

1.3

2.5

3.8

5.0

6.3

7.5

10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

10%過硫酸銨0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

TEMED

0.004

0.008

0.012

0.016

0.02

0.024


配制8%的PAGE分離膠

成分

所需各成分的體積(毫升)

凝膠體積

5

10

15

20

25

30

蒸餾水

2.3

4.6

6.99.3

11.5

13.9

30%丙烯酰胺混合液

1.3

2.7

4.0

5.3

6.7

8.0

1.5mol/L Tris(pH8.8)1.3

2.5

3.8

5.0

6.3

7.5

10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

10%過硫酸銨

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

TEMED

0.003

0.006

0.009

0.012

0.015

0.018


配制10%的PAGE分離膠

成分

所需各成分的體積(毫升)

凝膠體積

5

10

1520

25

30

蒸餾水1.9

4.0

5.97.9

9.9

11.9

30%丙烯酰胺混合液

1.7

3.3

5.0

6.7

8.3

10.0

1.5mol/L Tris(pH8.8)

1.3

2.5

3.8

5.0

6.3

7.5

10%SDS0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

10%過硫酸銨

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

TEMED

0.002

0.004

0.006

0.008

0.01

0.012


配制12%的PAGE分離膠

成分

所需各成分的體積(毫升)

凝膠體積

5

10

15

2025

30

蒸餾水1.63.3

4.9

6.6

8.2

9.9

30%丙烯酰胺混合液

2.0

4.0

6.0

8.0

10.0

12.0

1.5mol/L Tris(pH8.8)1.3

2.5

3.8

5.0

6.3

7.5

10%SDS

0.05

0.1

0.015

0.2

0.25

0.3

10%過硫酸銨

0.05

0.1

0.015

0.2

0.25

0.3

TEMED

0.002

0.004

0.006

0.008

0.01

0.012


配制15%的PAGE分離膠

成分

所需各成分的體積(毫升)

凝膠體積

5

10

15

20

25

30

蒸餾水

1.1

2.33.44.6

5.7

6.9
30%丙烯酰胺混合液

2.5

5.0

7.5

10.0

12.5

15.0

1.5mol/L Tris(pH8.8)

1.3

2.5

3.8

5.0

6.3

7.5
10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

10%過硫酸銨

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

TEMED

0.002

0.004

0.006

0.008

0.001

0.012


3. 按照如下表格配制SDS-PAGE的濃縮膠(也稱上層膠、積層膠或堆積膠)
                    
                                      配制不同體積的濃縮膠

成分

所需各成分的體積(毫升)

凝膠體積

2

3

4

5

6

8

蒸餾水

1.4

2.1

2.7

3.4

4.1

5.5

30%丙烯酰胺混合液

0.33

0.5

0.67

0.83

1.0

1.3

1.0mol/L Tris(pH6.8)

0.25

0.38

0.5

0.63

0.75

1.0

10%SDS

0.02

0.03

0.04

0.05

0.06

0.08

10%過硫酸銨

0.02

0.03

0.04

0.05

0.06

0.08

TEMED

0.002

0.003

0.004

0.005

0.006

0.008

 

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