神經衰退疾病研究新工具---α-突觸核蛋白寡聚體(SPR-484)

StressMarq商業(yè)投產α-突觸核蛋白寡聚體具有如下優(yōu)點：

①高含量α-突觸核蛋白寡聚體

②動態(tài)學穩(wěn)定 (kinetically stable/trapped)

③不含任何誘導劑或抑制劑 (多巴胺，EGCG)

④可用于活性電泳 (Native PAGE)，體內體外檢測及疾病建模

⑤stressmarq能夠量產α-突觸核蛋白寡聚體

上圖為動態(tài)學穩(wěn)定(kinetically stable) 的α-突觸核蛋白寡聚體(SPR-484) 電鏡圖。該寡聚體沒有使用任何誘導劑或抑制劑來鎖定寡聚體狀態(tài)，并且寡聚體含量能達到90%。

Stressmarq的SPR-484 的負染色透射電子顯微鏡圖像在 80 Kv 下使用磷鎢酸和醋酸鈾染色在碳涂層的 400 目銅網格上獲得?？梢郧逦目吹焦丫垠w結構，并且具有很高的均勻性。 

動態(tài)學穩(wěn)定的α突觸核蛋白寡聚體(SPR-484) 可在凍融后37℃下孵育兩周仍然穩(wěn)定 

(A)凍融一次后的動態(tài)學穩(wěn)定寡聚體的Native PAGE 

(B)和(C)分別是凍融一次后的和37℃孵育兩周后的尺寸排阻色譜(SEC)

在峰值處，90%SPR-484在凍融后37℃下孵育兩周仍然穩(wěn)定于寡聚體狀態(tài)

動態(tài)學穩(wěn)定的α突觸核蛋白寡聚體(SPR-484) 對多巴胺能神經元有毒性并且可以誘發(fā)帕金森病理現象(pSer129) 

(A) 經寡聚體處理后 11 天，大鼠原代多巴胺能神經元的存活率由抗 MAP2 抗體量化并表示為對照的百分比

(B) 經寡聚體處理后 11 天，大鼠原代多巴胺能神經元中存在的 α-突觸核蛋白 pSer129 水平通過抗 α-突觸核蛋白 pSer129 抗體與抗 MAP2 抗體的比率量化，表示為對照的百分比

所有數據經過統(tǒng)計學驗證，而非偶然性結果 

動態(tài)學穩(wěn)定的α突觸核蛋白寡聚體(SPR-484) 在大鼠原代多巴胺能神經元中誘導帕金森相關的pSer129病理現象 

(A)用對照PBS緩沖液處理后11天的大鼠原代多巴胺能神經元

(B) 用10 µg/mL SPR-484處理后11天的大鼠原代多巴胺能神經元

細胞核染色藍色(Hoechst)，多巴胺能神經元顯示紅色(MAP2)，病理現象為綠色(α-syn pSer129)

注：SPR-484為E.coli 表達的，在加入神經元之前沒有磷酸化

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