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相對于傳統(tǒng)SDS-PAGE制膠工藝，Merck公司的mPAGE® Lux制膠系統(tǒng)是一種更快速、簡單、安全的替代方法，可實現(xiàn)更具可重現(xiàn)性的結(jié)果。mPAGE® Lux制膠系統(tǒng)可在90秒內(nèi)完成小型凝膠固化，而傳統(tǒng)方法則需要90分鐘以上。該系統(tǒng)采用紫外線照射快速制膠工作流程，加速mPAGE® Lux Bis-Tris試劑固化——Bis-Tris凝膠化學試劑相對于傳統(tǒng)方法可縮短跑膠時間。
這種一步法光聚合工藝采用精密的系統(tǒng)控制，人為出錯的概率更低。mPAGE® 制膠器可防止?jié)B漏，選用的Bis-Tris凝膠比人工制備的Tris-Glycine凝膠條帶質(zhì)量更佳。此外，mPAGE® Lux試劑盒、mPAGE® TurboMix試劑盒和mPAGE® 預制膠均使用Bis-Tris化學試劑，共用同一跑膠緩沖液和凝膠染色劑。mPAGE® Lux制膠系統(tǒng)不使用APS或TEMED，有毒化學品用量更小，是一種更安全的替代方法。
傳統(tǒng)人工制膠工作流程
mPAGE® Lux工作流程
圖1. 傳統(tǒng)制膠工作流程與mPAGE® Lux對比。相對于傳統(tǒng)制膠技術(shù)，mPAGE® Lux制膠系統(tǒng)總步驟更少、聚合時間更短、有毒廢棄物更少。mPAGE® Lux制膠系統(tǒng)制得的凝膠兼容mPAGE® 小型膠槽和Bio-Rad Mini-PROTEAN電泳槽。為實現(xiàn)非凡的分離度并縮短跑膠時間，請使用mPAGE® 緩沖液。Lux凝膠兼容Bis-Tris適用的緩沖液和染色試劑。
圖2. mPAGE® Lux Bis-Tris凝膠和手制tris-甘氨酸凝膠的數(shù)據(jù)質(zhì)量對比。mPAGE® Lux Bis-Tris凝膠（左）和手制tris-甘氨酸凝膠（右）的條帶質(zhì)量對比。兩種凝膠都是10%丙烯酰胺，上樣A431人類細胞裂解物滴定液。電泳運行時間200V 下為 42 分鐘（Lux 凝膠），120V 下為119分鐘（tris-甘氨酸凝膠）。凝膠采用ReadyBlue™考馬斯凝膠染色劑染色。
圖3. 濕法、快速和半干法轉(zhuǎn)印方法蛋白質(zhì)印跡對比。對比采用12% mPAGE® Lux Bis-Tris凝膠，上樣A431人細胞裂解物滴定液，通過各種轉(zhuǎn)印方法轉(zhuǎn)印到Immobilon® -P膜上。使用抗EGFR和抗ErK1/2 抗體轉(zhuǎn)印膜，然后使用Immobilon® ECL Ultra Western HRP底物進行檢測。Turbo 方法 = 使用Bio-Rad Trans-Blot® Turbo™轉(zhuǎn)印系統(tǒng)和Trans-Blot® Turbo™轉(zhuǎn)印套裝進行轉(zhuǎn)印。
圖4. mPAGE® Lux Bis-Tris凝膠的重現(xiàn)性。A. 制備四份8%凝膠并上樣A341人細胞裂解物滴定液，隨后用ReadyBlue™考馬斯凝膠染色劑染色。B. 計算每份凝膠未染色分子量標記的相對遷移距離 (Rf)。揭示每個蛋白質(zhì)條帶的標準偏差。
圖5. mPAGE® Lux Bis-Tris試劑保質(zhì)期分析。mPAGE® Lux Bis-Tris制膠使用試劑(A) 0 個月、(B) 6個月或(C) 12 個月。運行模式或運行時間上未觀測到差異。
mPAGE® Lux制膠系統(tǒng)為您提供了創(chuàng)新的制膠工藝解決方案。您無須再在節(jié)省時間和節(jié)省資源方面作出取舍。全新的制膠系統(tǒng)讓研究人員可根據(jù)需要輕松快速制備凝膠，同時成本僅相當于預制膠技術(shù)的幾分之一。通過mPAGE® Lux制膠系統(tǒng)，可提高實驗室效率并升級凝膠電泳工作流程。
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