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ELISA 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本采集、處理和保存
一、ELISA實(shí)驗(yàn)中血清的采集、處理和保存1、真空采血針采集2ml新鮮血液，加入無菌試管中。2、采血后室溫靜置1小時(shí)。3、將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心10min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。4、取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?-8℃下，可放置保存24-48小時(shí)；-20℃下，可放置保存1個(gè)月；-70℃下，可放置保存6個(gè)月。5、根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測定。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧 -
出現(xiàn)問題出現(xiàn)問題的原因解決辦法曲線OD值不正常試劑盒未回溫試劑盒回溫到25℃溫度控制不好控制正確溫度孵育時(shí)間不準(zhǔn)確控制孵育時(shí)間洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過長、洗滌次數(shù)增加洗滌4-5次，每孔250ul，然后拍干陽光直射，對著風(fēng)直接吹避風(fēng)避光酶標(biāo)儀的波長錯(cuò)誤酶標(biāo)儀的波長450nm抗體的稀釋錯(cuò)誤正確的稀釋抗體水質(zhì)問題用礦泉水代替白板洗滌液配制錯(cuò)誤正確的配制洗滌液少加液體（抗體、酶標(biāo)記物、A液、B液）正確的步驟加液體錯(cuò)加液體無梯度標(biāo)準(zhǔn)品也污染換標(biāo)準(zhǔn)品點(diǎn)板OD值不正?？刂茰囟葧r(shí)間在做一次人為點(diǎn)板/線性不好
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重磅！ELISA實(shí)驗(yàn)操作幾點(diǎn)建議
試劑，儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。本文將敘述板式ELISA各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn)，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用，兩者均有詳細(xì)的使用說明，嚴(yán)格遵照規(guī)定操作，必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。一、標(biāo)本的采取和保存可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定（如血清、尿液 -
本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的敏感度。ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。然而，影響ELISA試驗(yàn)結(jié)果的因素很多，故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。ELISA試劑盒的操作方法雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘
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有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和其它標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在使用上有什么區(qū)別？
首先應(yīng)明確，只有有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)提供的認(rèn)定值或標(biāo)準(zhǔn)值才能夠用于校準(zhǔn)、為其他物質(zhì)賦值以及測量正確度確認(rèn)，并通過其使用來聲明測量結(jié)果的計(jì)量學(xué)溯源性。在我們的日常測量中，還會(huì)使用其它類型的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，它們主要用于開展測量質(zhì)量控制、測量精密度確認(rèn)等。有時(shí)，在缺少有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的情況，也不得不使用這些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來開展校準(zhǔn)等活動(dòng)，但是應(yīng)進(jìn)一步評估這些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是否符合有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的特征，或溯源性和量值不確定度水平能夠充分滿足測量結(jié)果溯源性和準(zhǔn)確度要求。有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的證書中，有時(shí)會(huì)提供一些額外的參考值或信息值，這些值通常 -
請根據(jù)您需要稱量的重量和容許誤差選擇合適的天平。如稱量少于10mg的產(chǎn)品，建議使用十萬分之一的分析天平。在購買產(chǎn)品時(shí)也請注意產(chǎn)品的重量能否滿足您的需求。一般采用增量法或減量法進(jìn)行稱量，以下是一些建議供您參考：a.稱量前：建議將產(chǎn)品直立放置一段時(shí)間，使產(chǎn)品全部集中至底部，便于取用。尤其是粘稠狀物質(zhì)，可以傾斜至與豎直方向呈45度，使產(chǎn)品集中在瓶底邊緣。如果當(dāng)心瓶蓋上有粘附，可以在未打開瓶蓋前甩動(dòng)瓶身，使產(chǎn)品集中至瓶底。b.粉末或晶體：建議采用增量法稱量，準(zhǔn)備合適的干燥容器，歸零后將產(chǎn)品傾倒在容器內(nèi)，
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對于化合物類產(chǎn)品，（標(biāo)準(zhǔn)品，小分子抑制劑，粉末類生化試劑等）我司保證所供產(chǎn)品質(zhì)量與我司所列標(biāo)準(zhǔn)相符。鑒于化學(xué)品的特殊性，賣方對未使用之前的產(chǎn)品質(zhì)量負(fù)責(zé)，對化學(xué)品的應(yīng)用不負(fù)有任何責(zé)任與間接的責(zé)任。在保存使用方面常見問題如下：1關(guān)于儲(chǔ)存條件大部分的試劑產(chǎn)品是比較穩(wěn)定的，只要您嚴(yán)格按照產(chǎn)品包裝或者說明書上的儲(chǔ)存條件進(jìn)行儲(chǔ)存，*可以保證其在有效期內(nèi)的正常使用。一般常見儲(chǔ)存條件有零下XX攝氏度，2-8攝氏度，常溫等。特別提醒，對于某些酶類制品，如果儲(chǔ)存條件是2-8攝氏度，不要儲(chǔ)存在零下，否則容易失活，對于
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常見慢性氣道疾病中大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物怎么用？指南告訴你
自從日本上世紀(jì)80年代發(fā)現(xiàn)大環(huán)內(nèi)酯類用于治療彌漫性泛細(xì)支氣管炎取得良好的效果后，大環(huán)內(nèi)酯類不依賴其抗菌作用的抗炎及免疫抑制效應(yīng)就有了越來越多的研究，這對于常見的慢性呼吸系統(tǒng)疾病如慢性阻塞性疾病及支氣管擴(kuò)張等有重要或潛在的價(jià)值。1.大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物[1]包括哪些？大環(huán)內(nèi)酯類按化學(xué)結(jié)構(gòu)，常見的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素有：(1)12元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類，如酒霉素等；(2)14元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類，包括紅霉素、羅紅霉素、克拉霉素、地紅霉素等；(3)15元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類，以半合成的阿奇霉素為代表藥物；(4)16元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類
