色譜柱裝填不良

　　裝填不良的色譜柱，在短時(shí)間應(yīng)用后，填充床的壓縮通常使柱頭處產(chǎn)生塌陷，導(dǎo)致柱效突然降低。色譜柱的初始評(píng)價(jià)指標(biāo)，如塔板數(shù)、不對(duì)稱(chēng)因子等往往不能很好地表征色譜柱床層的穩(wěn)定性，這種情緒只能在實(shí)際應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)。

　　壓力因素

　　高效液相色譜柱使用過(guò)程中的驟然壓力波動(dòng)、機(jī)械撞擊或溫度驟然變化都會(huì)對(duì)色譜柱床層產(chǎn)生影響，導(dǎo)致峰形變差和柱效降低。進(jìn)樣過(guò)程中，進(jìn)樣閥轉(zhuǎn)動(dòng)太慢可引起壓力波動(dòng)，使色譜柱床產(chǎn)生裂隙，在柱切換時(shí)也存在同樣的問(wèn)題。使用填充良好的色譜柱，在較低柱壓下操作，可大大減少由壓力波動(dòng)造成的色譜柱損壞。

　　篩板堵塞

　　色譜柱入口篩板堵塞是高效液相色譜柱常見(jiàn)的問(wèn)題之一，會(huì)導(dǎo)致柱壓升高、色譜峰拖尾、塔板數(shù)降低等問(wèn)題。通常分析樣品中微粒雜質(zhì)右可能堵塞色譜柱入口，因此分析時(shí)，需要先過(guò)濾或者離心，乳濁或渾濁樣品應(yīng)以0.25?m濾膜處理，也可用針頭過(guò)濾器過(guò)濾。進(jìn)樣器與泵密封墊的磨損也會(huì)帶入微粒，在進(jìn)樣閥與色譜柱之間使用0.25?m或0.45?m的在線(xiàn)過(guò)濾器，通常可以避免這類(lèi)問(wèn)題。

　　強(qiáng)保留樣品組分

　　強(qiáng)吸附性的樣品組分吸附在柱頭填料上，能?chē)?yán)重地影響液高效液相色譜柱壽命。像生物組織或體液的提取物、天然產(chǎn)物等復(fù)雜樣品，極易造成柱頭的污染。相對(duì)較純的樣品，一般不會(huì)出現(xiàn)這一問(wèn)題。色譜柱應(yīng)用中，色譜峰嚴(yán)重拖尾或分裂往往是強(qiáng)保留污染物在柱頭吸附的體現(xiàn)。

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