液相色譜儀系統(tǒng)主要由貯液瓶、泵、進(jìn)樣器、柱子、柱溫箱、檢測器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。對于整個(gè)系統(tǒng)而言,柱子、泵和檢測器是核心部件,同時(shí)也是易出問題的主要部位。液相色譜技術(shù)是近期發(fā)展起來的一種具有高靈敏度、高選擇性的快速分離、分析技術(shù).它既能用于微量組分的分析測定,又能用于大量的制備分離,靈活多樣,應(yīng)用范圍已超過其它各種分離方法。
液相色譜是目前應(yīng)用zui多的色譜分析方法,液相色譜系統(tǒng)由流動(dòng)相儲液體瓶、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動(dòng)相為液體的特點(diǎn)作出很多調(diào)整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn);進(jìn)樣系統(tǒng)要求進(jìn)樣便利切換嚴(yán)密;由于液體流動(dòng)相粘度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣體,為了減低柱壓液相色譜的色譜柱一般比較粗,長度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱。HPLC應(yīng)用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個(gè)領(lǐng)域。
液相色譜儀系統(tǒng)開機(jī)或者更換色譜柱時(shí),柱壓過高是常出現(xiàn)的問題。色譜柱壓過高的原因有兩種:
1、色譜柱本身的原因。主要表現(xiàn)在:長期使用受樣品污染造成區(qū)域堵塞,而引起柱壓過高.或者柱子在裝填或運(yùn)輸過程中受物理振動(dòng)造成填料松動(dòng),等柱子本身的問題。
2、柱壓過高很多常不是色譜柱本身的問題,而是色譜儀器或者液體管路,流動(dòng)相等外部原因引起的。
當(dāng)遇到液相色譜儀系統(tǒng)柱壓過高時(shí),我們應(yīng)該怎么解決呢? 首先應(yīng)該排查出引起柱壓過高的原因,而不應(yīng)武斷的把問題的原因怪罪在色譜柱的問題上主要步驟有:
1.拆去保護(hù)預(yù)柱,看柱壓是否還高,否則是保護(hù)柱的問題,若柱壓仍高,再檢查;
2.把色譜柱從儀器上取下,看壓力是否下降,否則是管路堵塞,需清洗,若壓力下降,再檢查;
3.將柱子的進(jìn)出口反過來接在儀器上,用10倍柱體積的流動(dòng)相沖洗柱子,(此時(shí)不要連接檢測器,以防固體顆粒進(jìn)入流動(dòng)池)。這時(shí),如果柱壓仍不下降,再檢查;
4.更換柱子入口篩板,若柱壓下降,說明您的溶劑或樣品含有顆粒雜質(zhì),正是這些雜質(zhì)將篩板堵塞引起壓力上升。