液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支,以液體為流動(dòng)相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的
液相色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。
液相色譜柱離效率高、速度快、流動(dòng)相可選擇范圍寬、靈敏度高、色譜柱可反復(fù)使用、流出組分容易收集,即可用與分離也可用于定量,在食品的安全性檢測(cè)和分析方面的應(yīng)用范圍將會(huì)越來(lái)越廣泛。
液相色譜柱是液相色譜儀上分離樣品的一款關(guān)鍵的產(chǎn)品與耗材,使用次數(shù)增多時(shí),會(huì)出現(xiàn)柱效下降,峰高降低,峰寬加大或者肩峰狀況。 一般的使用者可能會(huì)馬上更換色譜柱,其實(shí)有些問(wèn)題可以通過(guò)定期的清洗和再生來(lái)延長(zhǎng)液相色譜柱的使用壽命 。
液相色譜柱的再生方法如下:
1、反相色譜柱的沖洗與再生方法:
分別用甲醇:水=90:10、純甲醇、二氯甲烷等溶劑著流動(dòng)相,依次沖洗,每種流動(dòng)相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的色譜柱體積。然后再以相反的次序沖洗。
2、正相色譜柱的清洗與再生方法
分別用正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲醇等溶劑做流動(dòng)相,順次沖洗,每種流動(dòng)相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的柱體積(異丙醇粘度大,可降低流速,避免壓力過(guò)高)。注意使用溶劑的次序不要顛倒,用甲醇沖洗完后,再以相反的次序沖洗至正己烷。所有的流動(dòng)相必須嚴(yán)格脫水。
3、離子交換柱的再生
長(zhǎng)時(shí)間在緩沖溶液中使用和進(jìn)樣,將導(dǎo)致色譜柱離子交換能力下降,。用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽(yáng)離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。
用戶還可以選擇能溶解柱內(nèi)污染物的溶劑為流動(dòng)相做正方向和反方向沖洗。但再生后的色譜柱柱效是不可能恢復(fù)到新柱的水平的。
如果柱子裝反了,可以調(diào)回來(lái),但可能會(huì)造成柱內(nèi)擔(dān)體塌陷。在不得已的情況下盡量不要反裝色譜柱。