細胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA，RNA等導(dǎo)入真核細胞的技術(shù)。定義 隨著分子生物學(xué)和細胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常規(guī)工具。
下文中將從多個維度，介紹細胞轉(zhuǎn)染的各類小知識。
哺乳動物細胞表達系統(tǒng)能促使在其內(nèi)表達的蛋?正確折疊并進行復(fù)雜修飾，表達的蛋?更接近真實自然狀態(tài)，便于模擬真實細胞內(nèi)環(huán)境，進行蛋白功能研究。把目的基因轉(zhuǎn)入哺乳動物細胞，表達?產(chǎn)蛋?通常有兩種?式：瞬時轉(zhuǎn)染與穩(wěn)定轉(zhuǎn)染（構(gòu)建穩(wěn)定細胞系），如圖1.所示。
瞬時轉(zhuǎn)染與穩(wěn)定轉(zhuǎn)染有如下特點：
瞬時轉(zhuǎn)染 | 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 | |
基因融合 | 游離存在于染色體外（episome） | 整合于細胞染色體上 |
表達快慢 | 24-72小時內(nèi)可獲得表達產(chǎn)物 | 數(shù)天，需經(jīng)過基因融合、培養(yǎng)、篩選 |
待轉(zhuǎn)基因 | 不需要線性化，超螺旋結(jié)構(gòu)更容易轉(zhuǎn)染和表達 | 需要線性化，便于整合到宿主細胞 |
抗性選擇 | 待轉(zhuǎn)質(zhì)粒基因不需帶抗性 | 待轉(zhuǎn)基因必須帶有抗性，便于篩選克隆 |
成本 | 實驗室成本低 | 實驗室成本高，得到穩(wěn)定株后表達成本低 |
用途 | 蛋?質(zhì)的?規(guī)模合成 | 蛋?質(zhì)?規(guī)模合成，遺傳調(diào)控機制研究，長期藥理學(xué)研究 |
細胞轉(zhuǎn)染方法可分為化學(xué)法，物理法，生物法，也可把化學(xué)法、物理法稱為非病毒載體，生物法稱為病毒載體。不同的轉(zhuǎn)染方法可分別用于瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，不過效率與效果不同。
病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染是目前在細胞治療等應(yīng)用中有前景的方向，化學(xué)法，物理法在實施過程中，對細胞均有一定程度的損害，所以用于細胞治療藥物的研究受到限制。病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染也叫侵染。人類有漫長的和病毒斗爭的歷史，對病毒研究較為清晰，改造后病毒轉(zhuǎn)染結(jié)果相對可以控制。目前使用病毒載體的藥物已經(jīng)有多個上市，比如SMA基因治療藥物采用AAV病毒遞送，一針200萬美元，已上市3個CART用慢病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒（HIV的變種）來轉(zhuǎn)入基因，已上市的埃博拉病毒疫苗用AD26病毒載體等。
病毒載體的制備是目前CRO服務(wù)中的重要內(nèi)容，病毒載體的生產(chǎn)（如圖）先用大腸桿菌等生產(chǎn)出質(zhì)粒，然后把多種質(zhì)粒（通常是三質(zhì)粒或四質(zhì)粒系統(tǒng)）通過轉(zhuǎn)染進入細胞中，表達出病毒載體的外殼蛋白、功能蛋白等，然后組裝成含目的基因的病毒載體，通過純化工藝獲得工具病毒，工具病毒感染細胞，腺病毒可于轉(zhuǎn)染成功2小時后即可檢測到表達產(chǎn)物，逆轉(zhuǎn)錄病毒則需要經(jīng)過多輪賽選，選擇基因整合進細胞基因組的穩(wěn)定細胞株，用于后續(xù)研究。
Ps：李記生物EZ Trans細胞轉(zhuǎn)染試劑可用于各類病毒包裝。
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