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目錄:和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)>>細胞凋亡>> AC12L042/AC12L043Annexin V-647/PI 細胞凋亡檢測試劑盒

Annexin V-647/PI 細胞凋亡檢測試劑盒
  • Annexin V-647/PI 細胞凋亡檢測試劑盒
參考價 1180
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準
1180
≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 其他品牌
  • 型號 AC12L042/AC12L043
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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>

更新時間:2024-08-06 21:16:43瀏覽次數(shù):1499評價

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CAS / 純度 /
分子量 / 分子式 /
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
貨號 AC12L042/AC12L043 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
Annexin V-647/PI 細胞凋亡檢測試劑盒提供了一種快速簡便的方法,通過標記早期凋亡細胞(遠紅)和壞死細胞(紅色),用于檢測細胞凋亡水平。產(chǎn)品可以使用流式細胞儀或其它熒光檢測設(shè)備進行檢測。
Annexin V-647可以標記凋亡細胞。Annexin V選擇性結(jié)合磷酯酰絲*酸(phosphatidylserine,簡稱 PS)。在細胞發(fā)生早期凋亡時,PS 會外翻到細胞表面,即細胞膜外側(cè)。

產(chǎn)品描述
    Annexin V-647/PI  細胞凋亡檢測試劑盒提供了一種快速簡便的方法,通過標記早期凋亡細胞(遠紅)和壞死細胞(紅色),用于檢測細胞凋亡水平。產(chǎn)品可以使用流式細胞儀或其它熒光檢測設(shè)備進行檢測。
    Annexin V-647可以標記凋亡細胞。Annexin V選擇性結(jié)合磷酯酰絲*酸(phosphatidylserine,簡稱 PS)。在細胞發(fā)生早期凋亡時,PS 會外翻到細胞表面,即細胞膜外側(cè)。用遠紅色熒光探針647 標記的 Annexin V,即 Annexin V-647,可以結(jié)合外翻的磷酯酰絲*酸,從而檢測細胞凋亡的重要特征。我們公司的647染料與普通熒光素相比,熒光亮度更高,且不受環(huán)境中 pH 的影響,具有良好的光穩(wěn)定性。
  碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種 DNA 結(jié)合染料,它可以染色壞死細胞或凋亡晚期喪失細胞膜完整性的細胞的細胞核。PI 可以由 488,532 或 546 nm 的激光激發(fā),呈現(xiàn)紅色熒光。
光譜特性

  Annexin V-647: Abs/Em = 650/665 nm
  PI: Abs/Em = 535/617 nm (with DNA)

訂購信息

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

價格

Annexin V-647/PI 細胞凋亡檢測試劑盒

AC12L042

50 T

1180

Annexin V-647/PI 細胞凋亡檢測試劑盒

AC12L043

100 T

1880

產(chǎn)品組分

產(chǎn)品編號產(chǎn)品組成包裝規(guī)格
AC12L0421×Annexin V 結(jié)合緩沖液50 mL
Annexin V-647250 μL
PI500 μL
AC12L0431×Annexin V 結(jié)合緩沖液50 mL×2
Annexin V-647500 μL
PI1 mL

運輸與保存
  藍冰運輸。4℃避光保存,有效期24個月。

使用方法
    下列實驗方案以利用星形孢菌素誘導(dǎo)Jurkat細胞凋亡為例,如果使用其他誘導(dǎo)劑和其他類型的細胞,實驗條件需要略作調(diào)整。
1.流式細胞檢測
(1)根據(jù)實驗要求誘導(dǎo)細胞凋亡。檢測樣品中應(yīng)包含未經(jīng)處理的細胞樣品,作為陰性對照。此外,設(shè)定一組樣品做單染,用于調(diào)節(jié)補償。
(2)收集細胞。懸浮細胞:300 g,4℃離心5 min收集細胞;貼壁細胞:用不含EDTA的胰*消化后300 g,4℃離心5 min收集細胞,胰*消化時間不宜過長,以防引起假陽性。
注:用胰*白酶消化然后使細胞在合適的細胞培養(yǎng)條件和培養(yǎng)基中恢復(fù)約30分鐘,然后再染色。胰*白酶消化會暫時破壞質(zhì)膜,允許Annexin V結(jié)合磷脂酰絲*酸在細胞膜的細胞質(zhì)表面上,從而導(dǎo)致假陽性染色。
(3)用預(yù)冷的PBS洗滌細胞兩次,每次均在300 g,4℃下離心5 min,收集1-5×105個細胞并用100μL 1×結(jié)合緩沖液重懸細胞。
(4)每管加入 4-5μL的Annexin V-647和5μL的PI工作液。
注:我們推薦準備兩管額外的流式管,每管中只加入一種單染染料(Annexin V-647和PI各一管),用于流式的補償調(diào)節(jié)。
(5)室溫避光孵育 10-15 min,為避免影響細胞凋亡進程,孵育過程可在冰上操作。
(6)每管加入400μL的PBS或1×結(jié)合緩沖液,盡快通過流式細胞儀檢測細胞凋亡情況。Annexin V-647可以由647 nm激光激發(fā),檢測熒光發(fā)射光譜約在647 nm處(APC通道),PI發(fā)射光譜約在617 nm處。
2.熒光顯微鏡檢測
對于懸浮細胞,可參照流式細胞檢測的方法進行具體操作。

1.在蓋玻片或載玻片小室中接種細胞。
2.根據(jù)實驗要求誘導(dǎo)細胞凋亡。檢測樣品中應(yīng)包含未經(jīng)處理的細胞樣品,作為陰性對照。
3.用PBS 洗滌細胞。

注:細胞收集后如果不用PBS清洗,可以用含血清的培養(yǎng)基直接替代Annexin V結(jié)合緩沖液,但是 Annexin V的使用濃度需要重新優(yōu)化。
(4)每 100 μL的Annexin V結(jié)合緩沖液中加入5-25μL的Annexin V-647和 5μL的PI。
注:合適的使用濃度由具體實驗要求確定。
(5)向培養(yǎng)板中加入足量的染液以覆蓋全部細胞,室溫避光孵育15-30 min。為避免影響細胞凋亡進程,孵育過程可在冰上操作,但孵育時間至少延長至30 min。
(6)用 1×結(jié)合緩沖液清洗細胞。
(7)將孵育有細胞的蓋玻片置于載玻片上,載玻片可提前加一滴 1×結(jié)合緩沖液;對于培養(yǎng)在小室內(nèi)的細胞,可直接加入足量的 1×結(jié)合緩沖液覆蓋細胞。
(8)使用合適的濾光片在熒光顯微鏡下觀察細胞。Annexin V-647可用 APC 適用的濾光片,PI可用 Cy3或者Texas濾光片。

注意事項

  1. 產(chǎn)品僅限于科學(xué)實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

  2. 熒光染料均存在淬滅問題,保存和使用過程中請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。

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