E1010L2101 HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒

E1010L2101 HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒產(chǎn)品介紹

HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒適用于從抗凝處理的全血樣品中快速、高效地提取基因組DNA。提取過程采用超順磁性微球，無需離心操作；使用預(yù)制的緩沖液，可直接進(jìn)行提取，無需預(yù)先去除紅細(xì)胞。

本產(chǎn)品既可以手動進(jìn)行少量樣品的提取，也適合于用自動化工作站進(jìn)行高通量操作。提取的產(chǎn)物可用于酶切，PCR擴(kuò)增、檢測等后續(xù)實驗。

產(chǎn)品信息

操作流程

*使用前：

1、在Binding Buffer（③）中加入量（見瓶身標(biāo)簽）的異丙醇（分析純），并于“口”內(nèi)打上“√”，混勻后室溫下密閉保存。

2、在Washing Buffer I （④）中加入量（見瓶身標(biāo)簽）的無水乙醇（分析純），并于“口”內(nèi)打上“√”，混勻后室溫下密閉保存。

3、在Washing BufferⅡ（⑤）中加入量(見瓶身標(biāo)簽)的無水乙醇（分析純），并于“口”內(nèi)打上“√”，混勻后室溫下密閉保存。

準(zhǔn)備工作

1、1.5mL離心管：2個/樣品

2、單通道移液器:20μL、200μL、1000μL

3、漩渦振蕩器

4、垂直混合儀

5、恒溫水浴鍋/金屬?。?5℃

操作步驟：

1、裂解

取一個新的1.5mL離心管，加入200μL的抗凝血液樣品（不足200μL時可用PBS或Elution Buffer（⑥）補(bǔ)足），再分別加入10μL的Proteinase K Solution （⑦）和230μL的Lysis Buffer （②）,以渦旋振蕩器zui大轉(zhuǎn)速漩渦震蕩10s后，置于55℃條件下反應(yīng)5min。

2、結(jié)合

加入320μL的在Binding Buffer（③）(檢查是否已加入異丙醇）和20μL的HiPuri Beads（①），以渦旋振蕩器zui大轉(zhuǎn)速漩渦震蕩10min（或漩渦震蕩10s后置于垂直混合儀上反應(yīng)10min）。然后將離心管置于磁性分離器上放置2min，用移液器去上清液并取下離心管。

注：此步驟的磁性分離時間應(yīng)不少于2min。

3、洗滌

（1）加入600μL Washing Buffer I （④）（檢查是否已加入無水乙醇），漩渦震蕩1min或用移液器緩慢吹打磁珠20次，使磁珠20次，使磁珠充分重懸，再將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，用移液器去上滑液并取下離心管。重復(fù)該步驟一次。

（2）加入600μL Washing BufferⅡ（⑤）（檢查是否已加入無水乙醇），漩渦震蕩1min或用移液器緩慢吹打磁珠20次，使磁珠充分重懸，再于室溫下靜置1min后，將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液。

注：步驟（2）應(yīng)盡量除盡洗滌液。

4、干燥

保持離心管于磁性分離器上，于室溫下靜置10min后，取下離心管。

5、洗脫

加入100~200μL Elution Buffer （⑥），用移液器緩慢吹打磁珠50次，使磁珠充分重懸。然后于55℃條件下加熱5min，將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，轉(zhuǎn)移上清液至新的離心管中，此即為純化得到的基因組DNA，可保存于-20℃。

注意事項

1、操作之前，請務(wù)必認(rèn)真閱讀本產(chǎn)品手冊。

2、血液樣品的質(zhì)量對產(chǎn)物DNA的純化量有較大影響，應(yīng)避免反復(fù)凍融血液樣品。

3、應(yīng)避免對磁珠進(jìn)行冷凍、離心等操作。

4、磁珠取用前應(yīng)充分重懸均勻。

5、磁珠干燥前，應(yīng)使用移液器吸盡洗滌液。

6、應(yīng)避免磁珠過度干燥，否則會嚴(yán)重降低核酸洗脫效率。

7、建議使用質(zhì)量好的離心管和移液器吸頭，避免因粘附磁珠而造成損失。

8、在96孔板中進(jìn)行磁性分離操作時，磁珠吸附時間可適當(dāng)延長至4-5min。