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AP15L214-蛋白電泳預(yù)制膠 Tris-Glycine gel
  • AP15L214-蛋白電泳預(yù)制膠 Tris-Glycine gel
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貨物所在地:上海上海市

地: 上海

更新時間:2024-07-24 21:00:06

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蛋白電泳預(yù)制膠 Tris-Glycine gel是利用自動化灌膠技術(shù)生產(chǎn)的一款非常安全、方便、高質(zhì)量的預(yù)制聚acrylamide凝膠,且兼容市場上主流的電泳槽,可直接用于PAGE電泳及Western blot檢測,節(jié)省大量配膠時間,電泳時間,提高實驗效率。

蛋白電泳預(yù)制膠 Tris-Glycine gel

產(chǎn)品描述
  李記生物的
蛋白電泳預(yù)制膠 Tris-Glycine gel是利用自動化灌膠技術(shù)生產(chǎn)的一款非常安全、方便、高質(zhì)量的預(yù)制聚acrylamide凝膠,且兼容市場上主流的電泳槽,可直接用于PAGE電泳及Western blot檢測,節(jié)省大量配膠時間,電泳時間,提高實驗效率。
  本產(chǎn)品可完美替代Thermo XP00100BOX/XP00102BOX/P10202BOX等產(chǎn)品。
保存方法
        常溫下,可存放6個月;4~8℃下,可存放12個月;請勿置于0℃以下,以免凝膠發(fā)生凍裂。

訂購信息

 

產(chǎn)品編號濃度孔數(shù)大上樣量包裝分離范圍
AP15L2144~12%1060 μL10/200~15 KDa
AP15L2164~12%1530 μL10/200~15 KDa
AP15L2244~15%1060 μL10/200~10 KDa
AP15L2264~15%1530 μL10/200~10 KDa
AP15L2344~20%1060 μL10/200~3.5 KDa
AP15L2364~20%1530 μL10/200~3.5 KDa
AP15L2448~16%1060 μL10/200~5 KDa
AP15L2468~16%1530 μL10/200~5 KDa
AP15L2548~20%1060 μL10/200~6.5 KDa
AP15L2568~20%1530 μL10/200~6.5 KDa

*玻璃膠板尺寸:寬×高×厚度為98×84×4.1 mm;凝膠尺寸為:寬×高×厚度為81×74×1.5 mm;濃縮膠:4%,1.5cm。
*凝膠中不含SDS, 可用于變性和非變性電泳。
*均一膠可選濃度:6%、7.5%、8%、10%、12%、15%。
*梯度膠可選濃度:4~12%、4~15%、4~20%、8~16%、8~20%。也可以提供特殊濃度的定制服務(wù)。 


使用方法

1.將Tris-Glycine gel預(yù)制膠從包裝袋中取出,固定在電泳槽中。
2.按照電泳儀要求加好內(nèi)外槽電泳緩沖液,緩慢地將梳子拔出。
3.上樣:將處理好的蛋白樣品與loading buffer混合均勻,加熱處理后上樣。
4.電泳:恒壓180 V, 60 min左右,溴酚藍(lán)指示帶電泳至膠板底部,或?qū)嶒烆A(yù)定位置時,即可結(jié)束電泳。
5.電泳結(jié)束,取出凝膠。用刀在一側(cè)邊硅膠處,沿著兩片玻璃的縫隙切開封膠材料,即可打開玻璃板(請注意安全,使用帶握柄的刀片)

注意事項
1.推薦使用李記生物專門配制的變性Tris-Glycine Running Buffer(Cat.#: AP14L086)或非變性Tris-Glycine Running Buffer (Cat.#: AP14L096)。電泳緩沖液不建議重復(fù)使用,因為經(jīng)過電泳之后,緩沖液中的離子強度、緩沖能力都發(fā)生了變化,不能確保電泳效果。
2.如果需要蛋白條帶更加清晰、平直,可降低電壓至120V-150V, 適當(dāng)延長電泳時間。
3.請參考文末的分離譜圖選擇合適濃度的預(yù)制膠,便于進行更好的蛋白電泳條帶分離。
4.該預(yù)制膠可以兼容大部分電泳槽,例如Bio-Rad,北京六一,天能或其它膠板寬度在10 cm的電泳槽。

預(yù)制膠分離圖譜


 

常見問題分析及解決方案

 

常見問題可能原因建議解決方法
高濃度條帶樣品同時出現(xiàn)在相鄰泳道樣品量多或加到相鄰條帶降低上樣量,如有溢出,使用緩沖液沖洗上樣孔。
上樣孔破損移除制孔梳時加倍小心,如上樣孔破損,換用新凝膠。
凝膠干縮打開包裝后,盡快進行電泳。
可將凝膠在電泳緩沖液中浸泡一段時間,
待凝膠恢復(fù)形狀后上樣。
蛋白分離效果不佳樣品含鹽量過高使用透析、超濾,或稀釋等方法降低鹽濃度。
提高電泳緩沖液用量,或使用冰袋對緩沖液降溫等改善效果。
電泳時溴酚藍(lán)帶扭曲
電泳時間大幅度延長
內(nèi)槽緩沖液泄露重新夾一下膠板,防止在電泳過程中內(nèi)槽液面逐步降低。
上樣孔中有氣泡或殘留凝膠保存緩沖液上樣前,用移液槍吸取緩沖液輕輕沖洗上樣孔,將氣泡吹走。
樣品蛋白濃度過高使用上樣緩沖液稀釋蛋白樣品
凝膠安裝不當(dāng),內(nèi)槽漏液檢查內(nèi)槽密封條,墊片等附件是否安裝恰當(dāng)。
電壓設(shè)置有誤,或電泳緩沖液使用不當(dāng)確認(rèn)凝膠安裝位置,重新安裝凝膠。嚴(yán)格按照本說明書提供配方配置電泳緩沖液。
電泳后條帶模糊、變黃電泳緩沖液PH使用透析、超濾,或稀釋等方法降低鹽濃度。
凝膠濃度選擇不當(dāng)根據(jù)凝膠合適分離范圍選用不同濃度凝膠。對于小分子蛋白的分離,請選用較高分離膠濃度的預(yù)制膠產(chǎn)品。
蛋白量超出凝膠分離能力提高電泳緩沖液用量,或使用冰袋對緩沖液進行降溫。
電泳時泳道拖尾嚴(yán)重
點樣孔樣品滯留明顯
樣品裂解處理不充分,
 
裂解處理不夠充分。建議降低裂解前的樣品濃度,或增加裂解液的比例,使樣品充分裂解。
Loading buffer處理不充分。Loading buffer處理不充分。建議對裂解后的樣品進行稀釋后,再進行l(wèi)oading buffer 處理。
樣品中含有較大顆粒雜志如細(xì)胞碎片、菌體碎片。高速離心后,取上清液電泳。
電泳帶呈微笑狀(中間凹陷,兩邊突起)樣品鹽離子濃度或表面活性劑濃度過高稀釋樣品或?qū)悠愤M行透析后,再進行l(wèi)oading buffer處理和上樣。

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