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AN51L758-TRIzol
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貨物所在地:上海上海市

更新時間:2024-11-30 21:00:07

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TRIzol的主要成分是異硫 qíng 酸胍,它可以破壞細胞,使細胞RNA釋放出來,同時保護RNA的完整性,因此,常用于動植物細胞RNA的提取。

產(chǎn)品描述
     TRIzol主要成分是異硫 
qíng ,它可以破壞細胞,使細胞RNA釋放出來,同時保護RNA的完整性,因此,常用于動植物細胞RNA的提取。
訂購信息

產(chǎn)品名稱貨號規(guī)格價格
TRIzolAN51L758100 mL328


運輸與保存
常溫運輸。4℃保存,有效期12個月。
使用方法
1.準備樣品 
(1)組織樣品
液氮研磨組織法,組織塊直接放入研缽中,加入少量液氮,迅速研磨,待組織變軟,再加少量液氮,再研磨,如此三次,按組織樣品質(zhì)量與
 T R I z o l 體積按照50~100mg/mL加入,勻漿。
【注】:組織體積不能超過 T R I z o l 體積的10%, 否則勻漿效果不好,用電動勻漿器勻漿約需1~2 min 。
(2)細胞
對于培養(yǎng)貼壁細胞:不須消化,可直接用
 T R I z o l 進行消化裂解, T R I z o l 體積按10cm²/mL比例加入。
對于懸浮細胞可直接收集,消化裂解,每1 mL 
 T R I z o l 可裂解 5×106動物植物或酵母細胞,或1×107細菌細胞。

  1. 細胞或組織加 T R I z o l 后,室溫放置5 min,使其充分裂解。

【注】:此時可放入﹣70℃長期保持。

  1. 12,000g離心5 min,棄沉淀。
  2. 按200 μL氯仿/ml  T R I z o l 加入仿,振蕩混勻后室放置15 min。

【注】:禁用漩渦振蕩器,以免基因組DNA斷裂。
5. 4,12,000g離心15 min 。

  1. 吸取上層水相,至另一離心管中。

【注】:千萬不要吸取中間界面:若同時提取DNA和蛋白質(zhì),則保留下層酚相存于4℃冰箱,若只提RNA,則棄下層酚相。
7. 0.5ml異丙醇/mI
 T R I z o l 加入異丙醇混勻,室溫放置5~10 min 
8. 4 12,000g離心10 min, 棄上清,RNA沉于管底。

  1. 按1 mL 75%乙醇/ml  T R I z o l 加入75%乙醇,溫和振蕩離心管,懸浮沉淀。

10. 4 8,000g 離心5 min, 盡量棄上清液。

  1. 室溫晾干或真空干燥5~10 min。

【注】:RNA樣品不要過于干燥,否則很難溶解。
12. 可用50 μL H2OTE buffer或0.5%SDS溶解RNA樣品,55~60 ,5~10 min。
【注】:H2O.TE或0.5%SDS均須用DEPC處理并高壓。
注意事項
1.操作人員應(yīng)經(jīng)過專門培訓(xùn),嚴格遵守操作規(guī)程。
2.操作處置應(yīng)在具備局部通風或全面通風換氣設(shè)施的場所進行。
3.避免眼和皮膚的接觸,避免吸入蒸汽。
4.遠離火種、熱源,工作場所嚴禁吸煙。
5.整個提RNA過程需要無RNase的實驗用具。
6.本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
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