人白細(xì)胞介素35elisa試劑盒檢測中的技術(shù)支持

人白細(xì)胞介素35(IL-35)elisa試劑盒簡介

白細(xì)胞介素即是由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作用于多種細(xì)胞的一類細(xì)胞因子。[1]

目前至少發(fā)現(xiàn)了38個白細(xì)胞介素[2]  ，分別命名為IL-1~IL38，功能復(fù)雜，成網(wǎng)絡(luò)，復(fù)雜重疊[3]  ；在免疫細(xì)胞的成熟、活化、增殖和免疫調(diào)節(jié)等一系列過程中均發(fā)揮重要作用，此外它們還參與機(jī)體的多種生理及病理反應(yīng)。[1]

免疫系統(tǒng)細(xì)胞的增殖、分化和功能受到一系列細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)。根據(jù)細(xì)胞因子的結(jié)構(gòu)同源性可將其分為幾個蛋白質(zhì)家族，如IL-1家族、IL-6家族、IL-10家族、腫瘤壞死因子家族和造血因子家族等。白細(xì)胞介素穿插歸類為其中。

IL-38

結(jié)構(gòu)：白細(xì)胞介素(interleukin, IL)-38是zui近發(fā)現(xiàn)的IL-1家族細(xì)胞因子的第10個成員。IL-38的特異性受體為IL-36R，它是IL-36的部分受體拮抗劑。

功能：IL-38可抑制Th17細(xì)胞產(chǎn)生IL-17和IL-22等炎癥介質(zhì)，也可抑制IL-36γ誘導(dǎo)產(chǎn)生IL-8，從而抑制炎癥反應(yīng)。

人白細(xì)胞介素35(IL-35)elisa試劑盒檢測中的

間接法

　　1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜；

　　2.次日洗滌3次；

　　3.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌；

　　4.（同時做空白、陰性及陽性孔對照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml；

　　5.37℃孵育30-60分鐘，洗滌；

　　6.zui后一遍用DDW洗滌。

    7.加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

　　8.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

　　9.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

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