細菌蛋白提取試劑盒現(xiàn)貨供應

細菌蛋白提取試劑盒現(xiàn)貨供應

Bacterial Protein Extraction Kit 
包裝規(guī)格：10 Assays /50 Assays 
產品簡介：
細菌蛋白提取試劑盒能夠從細菌細胞中提取生物活性可溶性蛋白質和高純度包涵體。能夠與FLAG，poly-His和GST融合
蛋白親和層析純化系統(tǒng)兼容，還能與許多酶，蛋白質和蛋白酶抑制劑混合物兼容。該試劑盒能夠滿足1升細胞培養(yǎng)物（OD 600 
= 1）或10X 100~200 mg濕重的大腸桿菌的提取實驗。
組成：
組成 600596 600596 
10X Cell lysis buffer 5 ml 25 ml 
DNase/RNase 200 μl 1 ml 
Lysozyme 1 ml 5 ml 
PMSF 500 μl 2500 μl 
2X SDS gel-loading buffer 0.2 ml 1 ml 
保存條件：
常溫運輸，DNase/ RNAse，Lysozyme，2X SDS gel-loading buffer 和 PMSF 在-20°C 保存，其他產品在室溫下保存，保質
期 24 個月。
提取步驟：
1. 5000 xg離心10 min來收集表達目的蛋白的細胞。棄掉上清并用PBS沖洗沉淀。將細胞沉淀每100 ml細胞培養(yǎng)物（OD600 
= 1時）重懸于4 ml的1X細胞裂解緩沖液中。
2. 加入40 μl PMSF和80 μl溶菌酶，37℃孵育細胞懸浮液30 min。
3. 將混合物放在搖床上孵育10 min。
4. 加入20 ul DNaseI / RNase，37°C下繼續(xù)在搖床上孵育10 min。
5. 4°C下3,000 g離心30 min，去除不溶物。將細胞裂解液收集到干凈的試管中。
6. 通過10%SDS-PAGE電泳實驗，上樣量20 μl來分析提取物。將含有目的蛋白的組分保存在-70°C或直接通過純化柱純化。

細菌蛋白提取試劑盒現(xiàn)貨供應

Notes 
1. 可以加入蛋白酶抑制劑，但使用Ni2+親和柱純化時不能添加EDTA或其他螯合劑，因為螯合劑會破壞Ni柱與組氨酸標簽
的結合。
2. 上清液可能需要通過0.45 μm的過濾器，以防止后續(xù)純化過程中樹脂堵塞。
3. 細菌細胞也可以通過超聲處理（3×10秒）來溶解某些蛋白質，但是在超聲處理過程中需要保持低溫。
4. 在進行蛋白提取后盡快使用提取的蛋白質。
5. 溶于異丙醇的PMSF應保存在-20°C。

細菌蛋白提取試劑盒現(xiàn)貨供應