凍干粉標(biāo)準(zhǔn)菌株正確復(fù)溶方法

凍干粉標(biāo)準(zhǔn)菌株正確復(fù)溶方法
 

【冷凍管開(kāi)封】 用浸過(guò) 75%酒精的脫脂棉嚴(yán)格消毒冷凍管蓋。

【菌株復(fù)溶】無(wú)菌環(huán)境中旋開(kāi)裝有復(fù)溶液的滴瓶蓋，吸取 1ml 左右復(fù)溶液，加入到冷凍管中。輕輕振蕩，使凍干菌 株溶解呈懸浮狀。

【菌株復(fù)壯】用無(wú)菌吸管吸取菌懸液，轉(zhuǎn)移到復(fù)溶液滴瓶中。做好標(biāo)識(shí)，在適宜溫度下培養(yǎng)。細(xì)菌在 30-35℃培養(yǎng) 箱中培養(yǎng) 24-48h，真菌在 20-25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24-72h（必要時(shí)，可適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間）。

【菌株傳代】將得到的菌株的新鮮培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到適宜的固體培養(yǎng)基及液體培養(yǎng)基中（盡量增大接種量：如用無(wú)菌吸 管吸取≥50μl 新鮮培養(yǎng)物至固體培養(yǎng)基，邊移動(dòng)邊緩慢釋放），適宜溫度下培養(yǎng)，用以菌株的保藏、傳 代及制備工作菌株。

【注意事項(xiàng)】

1、 菌種活化前，將冷凍管保存在低溫、清潔、干燥的環(huán)境中，長(zhǎng)時(shí)間室溫下放置會(huì)導(dǎo)致菌種衰退；

2、 冷凍管開(kāi)封、凍干粉復(fù)溶、菌株恢復(fù)培養(yǎng)等操作應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行；

3、 一些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后，延遲期較長(zhǎng)，部分需連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)；

4、 苛養(yǎng)菌的培養(yǎng)需采用含特定營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，敬請(qǐng)正確選擇，不清楚時(shí)來(lái)電詢問(wèn)；

5、 某些厭氧菌的培養(yǎng)，自開(kāi)封到接種完成，均需以無(wú)氧氣體充填，以保持厭氧狀態(tài)；培養(yǎng)過(guò)程中亦要保 持厭氧狀態(tài)；

6、 某些菌種，如肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、淋病奈瑟菌等需要 5-10%CO2促進(jìn)生長(zhǎng)；

7、 如發(fā)現(xiàn)冷凍管蓋松動(dòng)、復(fù)溶液渾濁等異常情況，應(yīng)停止使用對(duì)應(yīng)產(chǎn)品。

8、 部分菌種有致病性、擴(kuò)散性，請(qǐng)專業(yè)人員在專業(yè)環(huán)境下有保護(hù)性操作。