為什么色譜總是以峰面積來(lái)定量
在色譜分析中,我們經(jīng)常會(huì)遇到各種問(wèn)題,比如相鄰峰分不開(kāi)、目標(biāo)峰受雜質(zhì)干擾、某一組分響應(yīng)值太低導(dǎo)致定量不準(zhǔn)確等。解決這些問(wèn)題的方法有很多,例如延長(zhǎng)出峰時(shí)間、改進(jìn)前處理步驟、使用標(biāo)準(zhǔn)加入法等。
然而,今天我們要分享的是一種簡(jiǎn)單高效的方法,可能只需動(dòng)動(dòng)手指就能解決問(wèn)題,可謂大道至簡(jiǎn)。
色譜圖的形成原理
首先,我們要了解色譜圖是怎么形成的,以實(shí)驗(yàn)室常用的二極管陣列檢測(cè)器為例:一般分為紫外光燈200~400nm和可見(jiàn)光燈400~800nm。大多數(shù)含有共軛結(jié)構(gòu)或極性較大的共價(jià)鍵化合物在這一波長(zhǎng)范圍內(nèi)都有吸收。
如下圖所示,同一種物質(zhì)在不同的波長(zhǎng)下的吸收是不一樣的,二極管陣列檢測(cè)器可以對(duì)某一化合物在200~800nm波長(zhǎng)下的吸收值進(jìn)行掃描和采集,再加上出峰時(shí)間這一維度,即可構(gòu)成下圖像“山脈"一樣的三維圖;而正視圖則是我們?cè)偈煜げ贿^(guò)的色譜圖;左視圖則是光譜圖,用于識(shí)別某一個(gè)峰的“具體樣貌",用作化合物的定性之用。