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多功能納米探針CuPc@HG@BN銅酞菁功能化六方氮化硼納米片

時(shí)間:2021-4-19閱讀:600
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 多功能納米探針CuPc@HG@BN銅酞菁功能化六方氮化硼納米片

一個(gè)由六方氮化硼納米片(h-BNNS)、發(fā)夾狀G4 DNA鏈(HG)和銅(Ⅱ)酞菁(CuPc)組成的多功能CuPc@HG@BN熱敏平臺(tái)用于miR-21的原位檢測(cè)和的光動(dòng)力。文章通過HG裝載CuPc形成CuPc @ HGCuPc的溶解度使其可以作為PDT的光敏劑(PS),然后形成CuPc@HG@BN使得CuPc在h-BNNS作用下得到較強(qiáng)的SERS信號(hào)。研究發(fā)現(xiàn)該探針不可以在降低對(duì)正常的損傷下實(shí)現(xiàn)對(duì)的光動(dòng)力,同時(shí)可以實(shí)現(xiàn)miR-21的原位SERS監(jiān)測(cè),這一研究成果實(shí)現(xiàn)了在同一探針中通過SERS與PDT相結(jié)合用于癥的診斷與。

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示意圖1:(a)CuPc@HG@BN的合成示意圖:其中富G的DNA序列(AS1411)裝載CuPc形成CuPc@HG,然后通過π-π 疊加將CuPc@HG修飾在h-BNNS上,構(gòu)造CuPc@HG@BN探針;(b)miR-21的原位SERS的監(jiān)測(cè)和的示意圖:納米材料在細(xì)胞膜表面核仁素作用下進(jìn)入胞內(nèi),在目標(biāo)RNA存在的條件下打研究夾DNA使得CuPc的SERS信號(hào)減弱,同時(shí)在光照下CuPc與細(xì)胞內(nèi)氧作用產(chǎn)生單線態(tài)氧,單線態(tài)氧和相鄰的生物大分子發(fā)生氧化反應(yīng),產(chǎn)生細(xì)胞性,進(jìn)而引起細(xì)胞受損直致死亡而癥的;(c)活細(xì)胞中miR-21放大檢測(cè)機(jī)制。

圖文解析

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圖1:(a) h-BNNS的透射電子顯微鏡(TEM)圖像,結(jié)果表明h-BNNS粒徑均勻,直徑為90±10 nm。插圖為對(duì)應(yīng)的h-BNNS大小分布直方圖;(b) h-BNNS的高分辨透射電鏡(HRTEM)圖像,顯示了一個(gè)界面間距為0.35nm的h-BNNS晶格條紋,并處于(002)面,插圖為選區(qū)電子衍射圖;(c) CuPc對(duì)SiO2和h-BNNS的SERS效應(yīng),結(jié)果表明在SiO2上CuPc的SERS可以忽略不計(jì)(黑色曲線),而CuPc在h-BNNS(紅色曲線)上CuPc的SERS效應(yīng)。(d) CuPc@HG@BN胞內(nèi)miR-21的SERS光譜。結(jié)果發(fā)現(xiàn)CuPc在1530 cm-1左右的強(qiáng)度隨miR-21水平的升高而降低,而h-BNNS在1367 cm-1處強(qiáng)度不變,表明可以以1367 cm-1處SERS強(qiáng)度作為內(nèi)參來實(shí)現(xiàn)胞內(nèi)miR-21的檢測(cè),插圖為用I1530/I1367表征胞內(nèi)miR-21,結(jié)果表明miRNA在1.6 fM–2.8 pM 范圍內(nèi)可以呈現(xiàn)線性,同時(shí)其檢測(cè)限達(dá)0.70 fM,表明該探針可以實(shí)現(xiàn)胞內(nèi)miRNA的高靈敏和選擇檢測(cè)。(e)細(xì)胞系和不同細(xì)胞類型胞內(nèi)miR-21的拉曼圖譜。

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圖2:(a)為了驗(yàn)證CuPc@HG@BN具有的PDT效應(yīng),文章通過單線態(tài)氧傳感器探針(SOSG)來表征CuPc@HG@BN產(chǎn)生單線態(tài)氧的能力(該探針與1O2反應(yīng)時(shí)產(chǎn)生較強(qiáng)的綠色熒光),結(jié)果表明用655 nm激光照射5 min后MCF-7胞內(nèi)出現(xiàn)較強(qiáng)的綠色熒光,在照射8h后觀察到1O2引起的細(xì)胞膜損傷,CuPc@Hg@BN具有的PDT效應(yīng)。(b)為了進(jìn)一步驗(yàn)證PDT的效率,文章采用Annexin-FITC/PI染色法進(jìn)行研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)相比于用CuPc@HG@BN處理的細(xì)胞,通過激光照射后的細(xì)胞的早期凋亡率和晚期細(xì)胞凋亡率均,表明該探針具有的PDT效率。

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圖3:考慮到SERS探針在生物介質(zhì)中的穩(wěn)定性,文章以MCF-7荷瘤裸鼠為模型,進(jìn)一步評(píng)價(jià)其體內(nèi)。(a)通過尾端靜脈Cy3標(biāo)記的CuPc@HG@BN后1~48 h的熒光成像,發(fā)現(xiàn)在6 h后可以在部位的觀察到的Cy3信號(hào),并且在48 h后任保持穩(wěn)定,表明CuPc@hg@BN在部位累積并可以保持了足夠長(zhǎng)的時(shí)間。(b、c)為了驗(yàn)證該探針可以實(shí)現(xiàn)標(biāo)志物的早期診斷,文章通過檢測(cè)不同日齡的小鼠癥周圍血清中miR-21表達(dá)水平,結(jié)果表明隨著的生長(zhǎng)時(shí)間的增加,血清中miR-21的濃度也逐漸增加,同時(shí)光動(dòng)力所需的CuPc@HG@BN濃度也逐漸增加。圖中各曲線分別表示(i)生長(zhǎng)兩天,用25 ug·mL-1 CuPc@HG@BN;ii),iii)生長(zhǎng)4天,分別用25 ug·mL-1和50 ug·mL-1CuPc@HG@BN;iv),v),vi) 生長(zhǎng)6天,分別用25、50 、65 ug·mL-1 CuPc@HG@BN; vii),viii),ix),x) 生長(zhǎng)9天,分別用25、50、65、100 ug·mL-1 CuPc@HG@BN;xi),xii) 生長(zhǎng)16天,分別用100、50 ug·mL-1 CuPc@HG@B; xiii),xiv) 生長(zhǎng)25天,分別用100、50 ug·mL-1 CuPc@HG@BN; (D)15天后,Ⅰ、Ⅱ、vi、x、xii、XIII組圖片,表明早期可以*,而晚期無法*。e)從i、ii、vi、x、xii和xiii組小鼠提取的細(xì)胞的拉曼圖像,結(jié)果表明在癥早期進(jìn)行可以使miR-21恢復(fù)到正常水平,表明CuPc@hg@BN具有早期抗的作用。

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