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更新時間:2024-10-25 10:20:50瀏覽次數(shù):1044次
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1.原理
該檢測方法可用于特異性檢測β-木聚糖酶的活力。用木聚糖酶孵育Azo-木聚糖,底物發(fā)生分解,產(chǎn)生低分子量染色片段,與乙醇形成反應(yīng)混合物。離心去除高分子量產(chǎn)物,對上清液進行檢測。木聚糖酶的活力可從標(biāo)準(zhǔn)曲線中獲得。
2.底物
首先將樺木木聚糖純化(去除淀粉),然后用藍(lán)色染料R染色,1分子染料連接30分子糖基。
3.溶解
將1g粉狀底物加入到帶加熱板和磁力攪拌棒攪拌的80mL劇烈沸騰的水中,之后關(guān)閉熱源,繼續(xù)攪拌,直至多聚糖*溶解(約20min)。定容至100ml,加入0.02g疊氮互鈉,并使其溶解。該溶液4℃下可保存12個月。使用前應(yīng)振蕩試劑瓶,該溶液是粘性的,應(yīng)用容積式移液器移?。ㄈ?span>Eppendorf Multipette® with a 5.0 mL Combitip)。
4.沉淀劑溶液
工業(yè)甲基化酒精(IMS;95%v/v)或乙醇(95%v/v)。
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