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每個(gè)公司生產(chǎn)的凝膠成像從結(jié)構(gòu)上看都是差不多的,都可以用于DNA/RNA/蛋白質(zhì)等凝膠電泳不同染色(如EB、考馬氏亮藍(lán)、銀染)等非化學(xué)發(fā)光成像檢測(cè)分析,主要區(qū)分看凝膠成像的靈敏度與分辯率,要想拍出的圖像質(zhì)量好主要是取決于CCD的尺寸、像素,還有成像的一個(gè)軟件功能。關(guān)于CCD的介紹:一:CCD是ChargeCoupledDevice(電荷耦合器件)的縮寫(xiě),它是一種半導(dǎo)體成像器件,因而具有靈敏度高、抗強(qiáng)光、畸變小、體積小、壽命長(zhǎng)、抗震動(dòng)等優(yōu)點(diǎn)。(1)CCD尺寸與圖像質(zhì)量CCD尺寸是影響其成像表現(xiàn)力的一
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出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增帶PCR擴(kuò)增后出現(xiàn)的條帶與預(yù)計(jì)的大小不致,或大或小,或者同時(shí)出現(xiàn)特異性擴(kuò)增帶與非特異性擴(kuò)增帶。非特異性條帶的出現(xiàn),其原因:是引物與靶序列不*互補(bǔ)、或引物聚合形成聚體。是Mg2+離子濃度過(guò)、退火溫度過(guò)低,及PCR循環(huán)次數(shù)過(guò)多有關(guān)。其次是酶的質(zhì)和量,往往些來(lái)源的酶易出現(xiàn)非特異條帶而另來(lái)源的酶則不出現(xiàn),酶量過(guò)多有時(shí)也會(huì)出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增。其對(duì)策有:必要時(shí)重新設(shè)計(jì)引物。減低酶量或調(diào)換另來(lái)源的酶。降低引物量,適當(dāng)增加模板量,減少循環(huán)次數(shù)。適當(dāng)提退火溫度或采用溫度點(diǎn)法(93℃變性,65℃左右退
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瓊脂糖凝膠電泳的原理及實(shí)驗(yàn)過(guò)程
實(shí)驗(yàn)原理瓊脂糖凝膠電泳常用于分離、鑒定DNA、RNA分子混合物,以瓊脂凝膠作為支持物,利用DNA分子在電場(chǎng)中時(shí)的電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng),達(dá)到分離混合物的目的。DNA分子在高于其等電點(diǎn)的溶液中帶負(fù)電,在電場(chǎng)中由陰極向陽(yáng)極運(yùn)動(dòng)。在一定的電場(chǎng)強(qiáng)度下,忽略DNA分子攜帶的電荷,DNA分子的遷移速度取決于分子篩效應(yīng),即分子本身的大小和構(gòu)型是主要的影響因素。DNA分子的遷移速度與相對(duì)分子量成反比。不同構(gòu)型的DNA分子的遷移速度不同。如環(huán)形DNA分子樣品,其中有三種構(gòu)型的分子:超螺旋分子(cccDNA)、開(kāi)環(huán)分 -
蛋白質(zhì)技術(shù)專題:SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)外源蛋白的表達(dá)
實(shí)驗(yàn)原理]SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS—PAGE)是蛋白分析中經(jīng)常使用的一種方法。它是將蛋白樣品同離子型去垢劑十二烷基硫酸鈉(SDS)以及巰基乙醇一起加熱,使蛋白變性,多肽鏈內(nèi)部的和肽鏈之間的二硫鍵被還原,肽鏈被打開(kāi)。打開(kāi)的肽鏈靠疏水作用與SDS結(jié)合而帶負(fù)電荷,電泳時(shí)在電場(chǎng)作用下,肽鏈在凝膠中向正極遷移。不同的大小的肽鏈由于在遷移時(shí)受到的阻力不同,在遷移過(guò)程中逐漸分開(kāi),其相對(duì)遷移率與分子量的對(duì)數(shù)間成線形關(guān)系。pGLO是將綠色熒光蛋白(GFP)的基因克隆在阿拉伯糖啟動(dòng)子之后的一種表達(dá)載體。攜 -
電腦核酸蛋白檢測(cè)儀是自動(dòng)液相色譜分離層析儀中分離具有紫外吸收物質(zhì)(蛋白、核酸、多肽、酶)的種紫外檢測(cè)裝置,其原理是根據(jù)物質(zhì)(樣品)對(duì)紫外光有明顯吸收的特征,實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品成份含量比對(duì)分析,以便進(jìn)行樣品蛋白、核酸物質(zhì)識(shí)別檢測(cè)和含量測(cè)定。可直接讀出光密度A值,且波長(zhǎng)準(zhǔn)確度和重復(fù)性、單色性好、定性、定量分析中能直接記錄各個(gè)峰面積的相對(duì)峰面值,并能計(jì)算質(zhì)量相對(duì)的含量。產(chǎn)品具有微量樣品池進(jìn)行連續(xù)檢測(cè)功能,在柱層析分離分析過(guò)程中,洗脫液流過(guò)嘉鵬樣品池,層析圖譜采集儀即可自動(dòng)繪制出樣品分離的圖譜(吸收峰或透過(guò)峰)
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曾經(jīng)在過(guò)去的很多年,科研人員需要通過(guò)不斷重復(fù)的工作對(duì)凝膠進(jìn)行保存,以記錄辛辛苦苦得來(lái)的凝膠結(jié)果,浪費(fèi)了很多時(shí)間與精力。自從凝膠成像儀的誕生以來(lái),科研人員已經(jīng)不再需要如此辛苦,他們可以利用現(xiàn)代化的手段快速而準(zhǔn)確的記錄下試驗(yàn)結(jié)果,并且可以方便地獲得分析和組織實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)。如今,凝膠成像分析系統(tǒng)已經(jīng)不僅僅是種凝膠記錄的手段,普遍應(yīng)用于蛋白、DNA的凝膠記錄中了,更是種印跡分析,數(shù)據(jù)獲得的方式。實(shí)際上,大多數(shù)凝膠成像分析系統(tǒng)在初期階段都是由差不多的部件組成的,并沒(méi)有什么本質(zhì)性的區(qū)別。但是上海嘉鵬科技有限公
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1、廢水的組成與危害實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的廢水包括多余的樣品、標(biāo)準(zhǔn)曲線及樣品分析殘液、失效的貯藏液和洗液、大量洗滌水等。幾乎所有的常規(guī)分析項(xiàng)目都不同程度存在著廢水污染問(wèn)題。這些廢水中成分包羅萬(wàn)象,包括常見(jiàn)的有機(jī)物、重金屬離子和有害微生物等及相對(duì)少見(jiàn)的fu化物、細(xì)菌、毒素、各種農(nóng)藥殘留、藥物殘留等。含有超標(biāo)重金屬的廢水一旦排到干凈下游,就會(huì)污染大片水源。由于這種受重金屬污染的水在顏色、氣味等方面與正常水沒(méi)有差別,一旦用這些水來(lái)灌溉,必然會(huì)讓土壤及農(nóng)作物成為重金屬污染對(duì)象。人吃了在重金屬污染的土壤上種出來(lái)的農(nóng)
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安全的生產(chǎn)使用是一切的根本,所以為了讓大家可以靈活,安全的使用臺(tái)式高速離心機(jī),下面跟大家講解一下臺(tái)式高速離心機(jī)操作時(shí)的注意事項(xiàng)。1、使用前必須仔細(xì)查看說(shuō)明書(shū)及操作規(guī)程,掌握離心機(jī)高轉(zhuǎn)速,查看安裝的轉(zhuǎn)子型號(hào)是否與設(shè)置的型號(hào)相符,確定轉(zhuǎn)子是否固定如果未固定用的固定工具將螺栓固定好。2、設(shè)置時(shí)間和溫度,正式運(yùn)轉(zhuǎn)前要進(jìn)行預(yù)致冷,將轉(zhuǎn)數(shù)調(diào)到2000rpm左右的低速狀態(tài),蓋好離心機(jī)蓋,啟動(dòng)離心機(jī),溫度開(kāi)始下降,直至達(dá)到需要的致冷溫度。3、樣品離心前應(yīng)事先兩兩配平,如出現(xiàn)奇數(shù)個(gè)離心管時(shí)要用另一只裝清水的離心管