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激光共焦顯微鏡的工作原理分析
閱讀：1396發(fā)布時間：2017-9-5
激光共焦顯微鏡的工作原理分析
激光共焦顯微鏡基于模塊化概念而設計，可集成多種功能，不僅包括納米技術，還可靈活升級到受激發(fā)射損耗系統(tǒng)(STED)。更有超高分辨率激光掃描共聚焦顯微鏡，激光共焦顯微鏡采用*光學技術，滿足您對分辨率的高要求。激光共焦顯微鏡是20世紀80年代發(fā)展起來的一項具有劃時代意義的高科技新產品，是當今世界的細胞生物學分析儀器。激光共焦顯微鏡是在熒光顯微鏡成象的基礎上加裝激光掃描裝置，使用紫外光或可見光激發(fā)熒光探針，利用計算機進行圖象處理，對生物樣品進行定性、定量、定時和定位研究。激光共焦顯微鏡已廣泛應用于細胞生物學、生理學、病理學、解剖學、胚胎學、免疫學和神經生物學等領域。
激光共焦顯微鏡利用激光束經照明針孔形成點光源對標本內焦平面的每一點掃描，標本上的被照射點，在探測針孔處成像，由探測針孔后的光電倍增管(PMT)或冷電耦器件(cCCD)逐點或逐線接收，迅速在計算機監(jiān)視器屏幕上形成熒光圖像。照明針孔與探測針孔相對于物鏡焦平面是共軛的，焦平面上的點同時聚焦于照明針孔和發(fā)射針孔，焦平面以外的點不會在探測針孔處成像，這樣得到的共聚焦圖像是標本的光學橫斷面，激光共焦顯微鏡克服了普通顯微鏡圖像模糊的缺點。
激光共焦顯微鏡利用放置在光源后的照明針孔和放置在檢測器前的探測針孔實現(xiàn)點照明和點探測，來自光源的光通過照明針孔發(fā)射出的光聚焦在樣品焦平面的某個點上，該點所發(fā)射的熒光成像在探測針孔上，該點以外的任何發(fā)射光均被探測針孔阻擋。激光共焦顯微鏡照明針孔與探測針孔對被照射點或被探測點來說是共軛的，因此被探測點即共焦點，被探測點所在的平面即共焦平面。計算機以像點的方式將被探測點顯示在計算機屏幕上，為了產生一幅完整的圖像，由光路中的掃描系統(tǒng)在樣品焦平面上掃描，從而產生一幅完整的共焦圖像。只要載物臺沿著Z軸上下移動，將樣品新的一個層面移動到共焦平面上，樣品的新層面又成像在顯示器上，隨著Z軸的不斷移動，激光共焦顯微鏡就可得到樣品不同層面連續(xù)的光切圖像。
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