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裝滿培養(yǎng)液的干細(xì)胞如何處理?
閱讀:685 發(fā)布時(shí)間:2018-4-10很多人都會(huì)遇到從其他地方買來(lái)干細(xì)胞或者快遞運(yùn)來(lái)細(xì)胞,裝滿培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶的細(xì)胞怎么處理的問(wèn)題。
第 1 步:先放 37℃ 培養(yǎng)箱放置 4 小時(shí),這樣細(xì)胞在通過(guò)長(zhǎng)途跋涉以后得以穩(wěn)定,觀察細(xì)胞狀態(tài)。
第 2 步:將新鮮培養(yǎng)基和舊的培養(yǎng)基 1:1 稀釋,如果細(xì)胞狀態(tài)不好,可以將血清濃度提到 15%,否則正常培養(yǎng),這樣有一個(gè)過(guò)渡期,不至于細(xì)胞換血清之后狀態(tài)不佳,15% 的血清培養(yǎng) 48 h 之后換成正常濃度培養(yǎng)。
細(xì)胞胞質(zhì)疏松,狀態(tài)不好,養(yǎng)不起來(lái),怎么辦?
策略 1:一般情況下,從血清下手就行,要么換好血清,要么提高血清濃度,血清濃度提高到 15%~20% 培養(yǎng) 48 h,換成正常 10% 的濃度,用高濃度的血清培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)對(duì)細(xì)胞有毒性。
策略 2:血清下手之后可以同時(shí)采取提高細(xì)胞密度的方法,從培養(yǎng)瓶換到六孔板,12 孔板等,細(xì)胞密度大,細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子多,腫瘤細(xì)胞通過(guò)旁分泌途徑促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。
預(yù)防策略:干細(xì)胞胞質(zhì)疏松,老化的原因在于細(xì)胞傳代次數(shù)比較多,胰酶消化時(shí)間太長(zhǎng),這時(shí)候,一定要控制細(xì)胞傳代次數(shù),注意胰酶消化時(shí)間,胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),容易導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)不佳以及胞質(zhì)疏松。有一招,元元沒(méi)試過(guò),可以嘗試,將細(xì)胞凍起來(lái),過(guò)段時(shí)間復(fù)蘇,細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)得比較好。
免疫測(cè)定用 14.2μg/支 150536-9903 人胎盤(pán)泌乳素(HPL)
免疫測(cè)定用 2ug/支 540-9410 鐵蛋白
免疫測(cè)定用 320ng/支 150541-0210 癌胚抗原
免疫測(cè)定用 800ng/661IU/支 150542-0004 甲胎蛋白
免疫測(cè)定用 150ng/支 150543-0004 前列腺特異抗原
免疫測(cè)定用 0.5ml/支 150544-200702 游離前列腺特異抗原
免疫測(cè)定用 50ng/支 150550-0004 三碘甲腺原氨酸
免疫測(cè)定用 1000ng/支 150551-0004 甲狀腺素
免疫測(cè)定用 23ng/支 150552-0004 反三碘甲腺原氨酸
干細(xì)胞