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技術(shù)文章

轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)小技巧

閱讀:314          發(fā)布時間:2018-7-31

轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)的路上,有多虐心就有多少要注意的地方。大家擦干眼淚,聽小納君說幾句,希望下面這幾點建議可以幫助你在細(xì)胞培養(yǎng)的路上,少一點污染,多一點快樂!

細(xì)胞方面

1. 不管是買的細(xì)胞,還是別人惠贈的細(xì)胞,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測是否有支原體污染;迅速擴(kuò)增凍存,凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基。

2. 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時。細(xì)菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細(xì)胞會長的慢,可以買個支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。

3. 不同細(xì)胞生長周期不同。有的生長很快,比如說 MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢,比如 BT474,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時候兩周多才能長滿。這就需要要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索。

4. 對于嬌弱的細(xì)胞,就得細(xì)心呵護(hù)。胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間。每天都要去看一下細(xì)胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)化細(xì)胞生長狀況。記住,是每天。

 phospho-Tau protein (Thr489) 表皮生長因子抗體(小鼠)

 Phospho-TBK1/NAK (Ser172) 表皮生長因子抗體(人)

 Phospho-TCTP(Ser46) 表皮生長因子抗體(大鼠)

 Phospho-Tie2 (Ser1119) 表皮膜蛋白1抗體

 Phospho-Tie2 (Tyr992) 臂板蛋白4C抗體

 Phospho-TIF1beta(Ser824) 臂板蛋白3F抗體

 Phospho-TLK1(Ser695) 臂板蛋白3A抗體

 Phospho-TNK1 (Tyr277) 鼻咽癌細(xì)胞相關(guān)基因6抗體

 phospho-TOPO II Alpha (Ser1106) 鼻咽癌癌基因抗體

 Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151) 苯乙醇胺甲基轉(zhuǎn)移酶抗體

轉(zhuǎn)化細(xì)胞

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