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IgA elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作技巧
閱讀:128 發(fā)布時(shí)間:2021-1-13IgA elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作技巧:
1.操作前應(yīng)對(duì)試驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18 C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗刷的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。
2.正確使用加樣器加樣器應(yīng)筆直參加標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過(guò)程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次第要與說(shuō)明書(shū)一起,否則可導(dǎo)致效果過(guò)錯(cuò),試驗(yàn)重復(fù)性差。
3.手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大,洗刷次數(shù)不要逾越說(shuō)明書(shū)舉薦的洗刷次數(shù),洗液在反應(yīng)孑L內(nèi)停留的時(shí)間不宜太長(zhǎng)。不要使洗液在孑L間竄流,形成孔問(wèn)污染,導(dǎo)致假陰性或假陽(yáng)性。
4.要保證加液量一起 我們?cè)谑褂脮r(shí)感覺(jué)滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量禁絕,形成顯色不一致,判別過(guò)錯(cuò)。
5.顯色液量不可過(guò)多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽(yáng)光直射的環(huán)境下,加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng),顯色液量不能過(guò)多,避免顯色過(guò)強(qiáng)。
血漿:
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入 10 %( v/v )抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形 成,應(yīng)再次離心。
尿液、胸腹水、腦脊液:用無(wú)菌管收集,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分),仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。