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技術(shù)文章

人抑制素(INH)免疫組化試劑盒操作步驟

閱讀:383          發(fā)布時間:2021-11-11

人抑制素(INH)免疫組化試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

APOL6載脂蛋白樣蛋白6抗體

ARTS凋亡相關(guān)蛋白TGFb信號抗體

A2LD1A2LD1蛋白抗體

A4GNTα1,4-N-乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)移酶α4Gn-T抗體

AADAC芳香乙酰胺脫乙?;缚贵w

AADACL4芳香乙酰胺脫乙?;笜拥鞍?抗體

AASDHPPT氨基乙二酸半醛脫氫酶磷酸泛酰巰基乙胺轉(zhuǎn)移酶抗體

AASS賴氨酸酮戊二酸還原酶抗體

ANKRD6錨蛋白重復(fù)域6抗體

Arginase II精氨酸酶2抗體

AKR1C3醛固酮還原酶家族1成員C3抗體

ACTHR促腎上腺皮質(zhì)激素受體

AGRP褐黑素相關(guān)蛋白ART抗體

Adrenodoxin腎上腺皮質(zhì)線粒體鐵氧還蛋白抗體

AdracalinAllgrove綜合征相關(guān)蛋白抗體

AAV5 capsid protein VP1腺相關(guān)病毒5 VP1抗體

ALDH3A2脂肪醛脫氫酶抗體

AVPR1A抗利尿激素1A抗體

AVPR1B抗利尿激素受體1B抗體

ARFGEF2二磷酸腺苷核糖基化因子鳥嘌呤核苷酸交換因子2抗體

ATBF1α增強(qiáng)子結(jié)合蛋白1抗體

ATXN10脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)10抗體

AKAP7蛋白激酶A錨定蛋白7抗體

ABCA12腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體12抗體

ABCB9腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體9抗體

ABCD4三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體

ABLIM3肌動蛋白結(jié)合蛋白LIM3抗體

ACBD3高爾基復(fù)合體相關(guān)蛋白1抗體

ACACA乙酰輔酶A羧化酶1ACCα抗體

ANT1+ANT2+ANT3+ANT4腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1、2、3、4抗體

ADAM12去整合素樣金屬蛋白酶12

Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79)磷酸化乙酰輔酶A羧化酶1ACCα抗體

AX2R膜粘連蛋白2受體抗體


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