生發(fā)中心激酶樣激酶抗體抗?體分子標記技術

生發(fā)中心激酶樣激酶抗體抗體分子標記技術：

（一）原理

當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為殘基,殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。

（二）準備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應終止緩沖液；

（三）操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；

2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。

柱式水樣DNAout

柱式土壤DNAout

柱式微生物基因組DNAout

柱式細菌DNAout（50次）

病毒DNA提取

96孔板病毒DNAout(離心法)（1次）

96孔板病毒DNAout(離心法)（5次）

96孔板病毒DNAout(真空法)（見關聯(lián)產(chǎn)品）

M13噬菌體單鏈基因組DNAout（見關聯(lián)產(chǎn)品）

λ噬菌體DNAout（見關聯(lián)產(chǎn)品）

一管式病毒DNA-RNAout

一管式病毒DNAout（200次）

一管式病毒DNAout（50次）

柱式病毒DNAout

經(jīng)典法質(zhì)粒DNA提取

96孔板質(zhì)粒DNAout(離心法)

96孔板質(zhì)粒DNAout(真空法)（見關聯(lián)產(chǎn)品）

大提無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNAout

大提無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNAout

大提柱式Ti質(zhì)粒DNAout（見關聯(lián)產(chǎn)品）

大提柱式質(zhì)粒DNAout

革氏陽性細菌質(zhì)粒DNAout

中提柱式BAC DNAout

柱式BAC DNAout

柱式Ti質(zhì)粒DNAout（見關聯(lián)產(chǎn)品）

柱式酵母質(zhì)粒DNAout

柱式無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNAout

柱式質(zhì)粒DNAout(50次)

一步法質(zhì)粒DNA提取

一步法96孔板單菌落質(zhì)粒DNAout（離心法）（停產(chǎn)）

一步法96孔板單菌落質(zhì)粒DNAout（離心法）（停產(chǎn)）

一步法96孔板單菌落質(zhì)粒DNAout（真空法）（見關聯(lián)產(chǎn)品）

一步法96孔板質(zhì)粒DNAout（離心法）

一步法96孔板質(zhì)粒DNAout（真空法）（見關聯(lián)產(chǎn)品）

一步法大提質(zhì)粒DNAout