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解析腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)易出現(xiàn)的問(wèn)題

閱讀:253          發(fā)布時(shí)間:2017-8-17
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腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)的同學(xué)如果互相交流會(huì)發(fā)現(xiàn),不同的實(shí)驗(yàn)室有些規(guī)則是不一樣的,初學(xué)者經(jīng)常不知對(duì)錯(cuò),小編今天就和大家總結(jié)一下這些糾結(jié)的問(wèn)題,希望對(duì)你的細(xì)胞之路有所幫助。
細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí),是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO敏感之細(xì)胞外,絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞),在解凍之后,應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無(wú)法存活。
可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清品牌?
可以,但是不能頻繁更換。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。更換不同品牌的血清之初,可能細(xì)胞會(huì)有一個(gè)短暫的適應(yīng)過(guò)程,適應(yīng)后,好的血清會(huì)促進(jìn)細(xì)胞良好生長(zhǎng)。建議選擇合適的放心品牌血清,而不是在假貨橫行的當(dāng)下選擇昂貴的血清,因?yàn)楦邇r(jià)格*是假貨的重區(qū)。即使買(mǎi)到,也肯定造成了資金的浪費(fèi)。Clark血清致力于打造國(guó)內(nèi)*放心品牌血清,從銷售渠道控制、革命性外包裝、反饋跟蹤體系和重獎(jiǎng)打假四個(gè)方面入手,開(kāi)國(guó)內(nèi)先河,保證每一瓶都是,讓用戶放心。
培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?
除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。
細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?
腫瘤細(xì)胞冷凍保存時(shí)zui常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5 - 10% DMSO (dimethyl sulfoxide) 和90 - 95 %原來(lái)細(xì)胞生長(zhǎng)用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO 稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中,必須使用前先行配制完成。  
DMSO之等級(jí)和無(wú)菌過(guò)濾之方式為何?
冷凍保存使用之DMSO等級(jí),必須為T(mén)issue culture grade之DMSO (如Sigma D2650),其本身即為無(wú)菌狀況,*次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中,保存于4 C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機(jī)會(huì)。若要過(guò)濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜。
Chelidonine    白屈菜堿    476-32-4    20mg
Ellagic acid    鞣花酸    476-66-4    20mg
Mangiferin    芒果苷; 芒果甙    4773-96-0    20mg
Dehydrocostus lactone    去氫木香內(nèi)酯    477-43-0    20mg
Obtusifolin    決明蒽醌; 美決明子素    477-85-0    20mg
Bergenin    巖白菜素    477-90-7    20mg
Nobiletin    川陳皮素; 蜜橘黃素; 川皮亭    478-01-3    20mg
腫瘤細(xì)胞

 

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